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il-4诱导小鼠巨噬细胞m1m 动脉硬化（as）被认为是一种慢性炎症，mci参与了脂质沉积到各个阶段的所有过程。目前,对于巨噬细胞分型的研究成为该研究领域的热点,既往的研究认为在某些炎症性疾病中当巨噬细胞通过经典激活途径被诱导成为M1亚型后,可促进炎症的进展,而通过替代激活途径被诱导成为M2亚型后,则具有抗炎的作用。在炎症的推进过程中,由于受到不同的细胞信号通路和细胞因子的调控和影响,M1/M2亚型的平衡一直处于动态变化中,向任何一方的倾斜都决定了炎症的最终转归。根据已有的文献,使用i NOS和CD86,鉴定M1型巨噬细胞,使用MR和Arg I鉴定M2型巨噬细胞是经典方法,但是对于刺激剂量仍无统一的标准,本研究旨在摸索出较为合适的刺激浓度,在细胞状态良好的基础上成功诱导出M1/M2巨噬细胞亚型。在AS中,如能探明这一现象是否也符合上述研究的结论,则可以通过调控M1/M2巨噬细胞比例,进一步影响AS的进展,为AS的治疗提供了新的分子生物学靶点。 1 细胞活力及rna的提取 材料小鼠巨噬细胞系RAW264.7由第四军医大学肿瘤生物学国家重点实验室保藏并惠赠;IFN-γ和IL-4购于美国Perprotech公司;LPS购于美国Sigma公司;小鼠GAPDH,i NOS,CD86,MR和ArgⅠ引物均由北京三博远志生物技术有限责任公司合成;SYBR?Premix Ex TaqTMⅡ购于宝