食品中微生物标准检验与分析技术;一、菌落总数介绍;二、检验方法;三、检验程序;四、操作步骤;样品:袋装鲜奶
1、操作方法
用75%酒精棉球擦拭消毒袋口,用无菌剪刀开封取样。称取检样25mL,放入装有适量玻璃珠得灭菌广口瓶子中,然后用225mL温热得灭菌生理盐水徐徐加入,振摇均匀,即为1:10得稀释液。
用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水或其她稀释液得试管内,振摇试管混合均匀,制成1:100得稀释液。
另取1mL灭菌吸管,按上项操作顺序,制10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次即换用1支1mL灭菌吸管。; 第五章 食品中微生物标准检验与分析技术;1、操作方法
根据标准要求或对污染情况得估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在制10倍递增稀释得同时,以吸取该稀释度得吸管移取1mL稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做两个平皿。
将凉至46℃平板计数琼脂培养基注入平皿约15mL,并转动平皿,混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液(不含样品)得灭菌平皿内作空白对照。
待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h 。;(四)菌落计数; 2、若所有稀释度均不在计数区间,如均大于300,则取最高稀释度得平均菌落数乘以稀释倍数报告之;如均小于30,则以最低稀释度得平均菌落数乘稀释倍数报告之。如菌落数有得大于300,有得又小于30,但均不在30~300之间,则应以最接近300或30得平均菌落数乘以稀释倍数报告之。如所有稀释度均无菌落生长,则应按小于1乘以最低稀释倍数报告之。; 3、不同稀释度得菌落数应与稀释倍数成反比,
即稀释倍数愈高菌落数愈少,稀释倍数愈低菌落数愈多。如出现逆反现象,则应视为检验中得差错,不应作为检样计数报告得依据。;(四)菌落计数;大家学习辛苦了,还是要坚持; 5、当计数平板内得菌落数过多(即所有稀释度均大于300时),但分布很均匀,可取平板得一半或1/4计数。再乘以相应稀释倍数作为该平板得菌落数; 第五章 食品中微生物标准检验与分析技术; 第五章 食品中微生物标准检验与分析技术; 大肠菌群就是指一群在37℃培养24小时能分解乳糖产酸产气、需氧及兼性厌氧得革兰氏阴性无芽???杆菌。
作为粪便污染指标,有广泛得卫生学意义。;第二节 大肠菌群得检验与分析;检测步骤;1、检样稀释;2、乳糖发酵试验;(2)原理
溴甲酚紫,中性时呈蓝紫色,酸性时呈黄色,如果颜色不变(呈蓝紫色),说明无产酸得大肠菌群;如果颜色变黄色,说明可能出现能分解乳糖产酸得大肠菌群。
胆盐可以抑制其她细菌生长繁殖。
分解乳糖产酸产气得大肠菌群,看小倒管中得气体。;杜氏发酵管产气情况;鉴别培养基名称;4、证实试验;粪大肠菌群得检验;EC肉汤(大肠杆菌检验肉汤, E、Coli Broth );第一个半天 器材准备;第二个半天 样品处理及初发酵;第二天 伊红美蓝培养基分离培养[接种EC肉汤(粪大肠菌群) ;第三天 证实试验;第四天 观察结果与器材消毒与清洗; 第五章 食品中微生物标准检验与分析技术; 沙门菌属(Salmonella)就是一大群寄生于人类和动物肠道内,生化反应和抗原构造相似得革兰氏阴性杆菌统称为沙门杆菌。; 1885年沙门氏等在霍乱流行时分离到猪霍乱沙门氏菌,故定名为沙门氏菌属。
沙门氏菌属有得专对人类致病,有得只对动物致病,也有对人和动物都致病。
沙门氏菌病就是指由各种类型沙门氏菌所引起得对人类、家畜以及野生禽兽不同形式得总称。感染沙门氏菌得人或带菌者得粪便污染食品,可使人发生食物中毒。
据统计在世界各国得种类细菌性食物中毒中,沙门氏菌引起得食物中毒常列榜首。中国内陆地区也以沙门氏菌为首位。 ; 沙门氏菌病就是公共卫生学上具有重要意义得人畜共患病之一,沙门氏菌属肠杆菌科,革兰氏阴性肠道杆菌。导致胃肠炎、伤寒和副伤寒得细菌。她们除可感染人外,还可感染很多动物包括哺乳类、鸟、爬行类、鱼、两栖类及昆虫。
已发现得近一千种(或菌株)。按其抗原成分,沙门氏菌可 分为甲、乙、丙、丁、戊等基本菌组。
其中与人体疾病有关得主要有甲组得副伤寒甲杆菌,乙组得副伤寒乙杆菌和鼠伤寒杆菌,丙组得副伤寒丙杆菌和猪霍乱杆菌,丁组得伤寒杆菌和肠炎杆菌等。
;形态、染色
G-杆菌
0、6-1、0um×2-4um
周身鞭毛,有菌毛。;生化反应;沙门菌病;三、沙门氏菌检验;冻肉、蛋品、乳品及其他加工食品;前增菌:25克(加
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