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假赋生观赏植物假古代百合组培快繁技术研究 假昙花是黄连的叶子。又称“贝壳花”和“康复仙人掌”。它是巴西人参科的一种多年生草本植物。附生类型。株高15～20 cm, 多分枝, 花筒短, 花大, 花多, 花径6～8 cm;花瓣伸展较广, 是标准的辐射状花, 花色橙红而鲜丽, 花期长, 通常在3～4月开花。生长健壮, 是一种美丽的室内盆栽花卉, 用于装饰家庭的窗台、阳台或客厅, 优美大方, 是室内点缀的理想材料, 因而具有较大的市场潜力。假昙花多采用扦插、嫁接进行繁殖, 只能在生长季节进行, 不能进行周年生产, 但尚未见有关组织培养和快速繁殖的报道, 该试验所做的研究可为假昙花进行规模化生产提供依据。 1 材料和方法 1.1 材料表面 试验所用材料为假昙花盆栽植株。 1.2 方法 1.2.1 筛选出不同的生长调节剂 以KC为基本培养基, 添加BA、NAA、KT和IBA 4种生长调节剂, 配制成不同的剂量组合, 筛选出诱导效果最好的培养基 (见表1、2) 。 1.2.2 种不同生长调节剂组合增殖培养基 以KC为基本培养基A:以15种不同剂量、4种不同生长调节剂组合成增殖培养基 (见表3) ;B:以蛋白胨、水解蛋白、复合氨基酸、胰蛋白胨等添加物组成增殖培养基 (见表4) 。 1.2.3 茎尖诱导培养基的制备 取成熟植株长约2.0 cm左右的茎尖, 流水冲洗, 放入0.1% HgCl2溶液中灭菌10 min, 无菌水冲洗干净, 取茎尖1～2 mm接种在诱导培养基上。 1.2.4 培训条件 光照强度2 000 lx, 光照培养10 h, 黑暗培养14 h, 培养温度为 (23±2) ℃, 培养基pH 5.5。 1.2.5 菌株个的kc培养基 将增殖培养基上已开始分化的原球茎转接到含有0.1%活性碳+0.1～0.5 mg/L NAA+0.1～0.5 mg/L 2, 4-D的KC培养基上, 待植株长到2.0 cm 左右, 将其单个分开接种于新鲜培养基上, 每瓶接种10～15个。 1.2.6 观察和计算 28 d后统计茎节的培养和原球茎诱导的结果及不同生长调节剂和添加物培养原球茎的增殖结果, 35 d后统计茎尖及茎段的培养诱导的结果。 2 结果与分析 2.1 生长素对原球茎生长的影响 不同生长调节剂组合对原球茎形成的影响方面:对茎尖、茎段的诱导使用了4种植物激素的不同组合, 培养结果见表1、2。从表1可以看出, BA与NAA的组合对茎尖的诱导效果好于KT与NAA的组合, 诱导率最高可达70%, 最低为50%。从表2的结果来看, 13～18号培养基上的茎段不经过原球茎阶段直接出芽形成芽丛;1、7、8、10、11、12、19、20、21、22、23、24号培养基适合茎段的诱导培养, 不仅诱导率高, 而且每个外植体所产生的平均原球茎数也都在5个以上。因高浓度的生长调节剂易引起植株变异, 尽量选用浓度低的组合, 所以7、8号培养基较优。 由试验中还得到, 在细胞分裂素浓度相同的情况下, 随着生长素浓度的提高, 所形成的原球茎平均数降低。在原球茎分化成苗的过程中, 随生长素浓度的增加, 幼苗逐渐变得健壮、矮化。在细胞分裂素绝对浓度较高和生长素绝对浓度较高或很低时, 原球茎呈愈伤组织状。 2.2 原茎繁殖 2.2.1 再生苗中ba和血清中ba和igg-naa、ib-ib对原球茎增殖方向的影响 原球茎的增殖培养是实现假昙花快速繁殖的关键, 在适合的培养基上, 原球茎增殖很快, 分化后可得到大量再生苗。从表3可以看到, 试验中的组合对原球茎的增殖作用没有明显差异, 但不同的组合对原球茎的发育方向起调控作用。低浓度BA和较高浓度NAA或IBA使原球茎分化, 较高浓度的BA和低浓度的NAA或IBA维持原球茎增殖。综合考虑, 4、5号培养基较适宜原球茎增殖培养。 2.2.2 最佳复合添加物的筛选 从表4的结果中可以看到, 在KC培养基中附加不同浓度的4种复合添加物后, 以0.2%蛋白胨的培养效果最好, 其存活率和增殖率都最高, 并且在以后的培养中观察到, 分化的幼苗健壮, 颜色深绿。 2.3 ,4-d诱导幼苗生长 分化的原球茎在再生培养基上14 d后分化出芽, 30 d 后逐渐长出根。在培养过程中发现, 2, 4-D抑制幼苗生长, 只是浓度不同抑制的程度不同。浓度不同的NAA对幼苗生长差异不大, 随浓度提高, 苗壮矮化, 且在培养过程中生长调节剂可逐代积累, 因此成苗培养基为:KC+0.1 mg/L NAA+0.1%活性炭较适宜。 3 讨论 3.1 茎的发生与芽的关系 生长调节剂在原球茎和芽诱导中起主导作用。高浓度的细胞分裂素对原球茎的发生有利, 但高浓度不利于芽的产生。生长调节剂也对原球茎的增殖、生长发育起调控作用。低浓度BA和较高浓度NAA或IBA使原球茎分化,