超临界流体色谱法.docVIP

- . z. 超临界流体色谱法 色谱是用于样品组分别离的一种方法，组分在两相间进展分配，一相为固定相，另一相为流动相。固定相可以是固体或涂于固体上的液体，而流动相可以是气体、液体或超临界流体。超临界流体色谱(Supercritical fluid chromatography) 就是以超临界流体做流动相依靠流动相的溶剂化能力来进展别离、分析的色谱过程。它是集气相色谱法和液相色谱法的优势而在20世纪70年代开展起来的一种色谱别离技术。超临界流体色谱不仅能够分析气相色谱不宜分析的高沸点、低挥发性的试样组分，而且具有比高效液相色谱法更快的分析速率和更高的柱效，因此得到迅速开展。 概述 超临界流体及其特性 自从1869年Andrews首先发现临界现象以来，各种研究工作陆续展开，其包括1879年Hannay和Hogarth测量了固体在超临界流体中的溶解度，1937年Michels等人准确测量了二氧化碳临界点的状态等等。对于*些纯洁物质而言，根据温度和压力的不同，呈现出液体、气体、固体等状态变化，即具有三相点和临界点，纯物质的相图如 REF _Ref357691613 \h 图11所示。在温度高于*一数值时，任何大的压力均不能使该纯物质由气相转化为液相，此时的温度即被称之为临界温度Tc；而在临界温度下，气体能被液化的最低压力称为临界压力Pc。在临界点附近，会出现流体的密度、粘度、溶解度、热容量、介电常数等所有流体的物性发生急剧变化的现象。当物质所处的温度高于临界温度，压力大于临界压力时，该物质处于超临界状态。温度及压力均处于临界点以上的液体叫超临界流体(Supercritical fluid，SF)。 图 STYLEREF 1 \s 1 SEQ 图 \* ARABIC \s 1 1纯物质的相图 超临界流体由于液体与气体分界消失，它的流体性质兼具液体性质与气体性质，见 REF _Ref357692769 \h 表11所示。从 REF _Ref357692769 \h 表11中的数据可知，超临界流体的扩散性能和粘度接近于气体，因此溶质的传质阻力较小，能更迅速地到达分配平衡，获得更快速、高效的别离。另一方面，密度与液体相似，这样可以保证超临界流体具有与液体比较的溶解度，因此在较低的温度下，仍然可以分析热不稳定性和分子量大的物质，同时还能增加柱子的选择性。此外，超临界流体的扩散系数、粘度等都是密度的函数。通过改变液体的密度，就可以改变流体的性质，到达控制流体性能的目的。 表 STYLEREF 1 \s 1SEQ 表 \* ARABIC \s 1 1气体、液体和超临界流体的物理性质的比较 名称 密度 ρ/g·ml-1 粘度 ?/g(cm·s)-1 扩散系数 D/cm2·s-1 气体常压〔15-60℃〕 (0.6-2)×10-3 (1-3)×10-4 超临界流体Tc,Pc- Tc,4Pc (1-3)×10-4 (3-9)×10-4 0.7×10-3 0.2×10-3 液体〔有机溶剂，水，15-60℃〕 (0.2-3)×10-2 (0.2-2)×10-2 超临界流体色谱法及其特点 超临界流体具有液体相似的溶解能力，溶解能力比气体大，能溶解固体物质，这种溶解性质被用于别离过程，最先用于萃取技术-超临界流体萃取法〔supercritical fluid e*traction, SFE〕。后来，将超临界流体用作色谱的流动相，建立了超临界流体色谱法。 SFC因其超临界流体自身的一些特性，使得SFC的*些应用方法具有超过液相〔LC〕、气相〔GC〕两者的有点，有其独到之处，但它并不能取代这两类色谱，而是它们的有力补充。 SFC与GC的比较 SFC可以用比GC更低的温度，从而实现对热不稳定化合物进展有效的别离。由于柱温降低，别离选择性改良，可以别离手性化合物。 由于超临界流体的扩散系数比气体小，因此SFC的谱带展宽比GC的要窄。 SFC溶剂能力强，许多非挥发性组分在SFC中溶解度较大，可分析非挥发性的高分子、生物大分子等样品。 选择性较强，SFC可选用压力程序、温度程序，并可选用不同的流动相或者改性剂，因此操作条件的选择范围较GC更广。 SFC与LC的比较 分析时间短，由于超临界流体粘度低，可使其流动速率比高效液相色谱〔HPLC〕快得多，在最小理论塔板高度下，SFC的流动相速率是HPLC的3-5倍左右，因此别离时间缩短。 总柱效比LC高，毛细管SFC总柱效可高达百万，可分析极其复杂的混合物，而LC的柱效要低得多。当平均线速率为0.6 cm/s时，SFC法的柱效可为