小建中汤对白芍中芍药苷的含量测定.docxVIP

小建中汤对白芍中芍药苷的含量测定 小建中汤最早出现在“伤寒论”中。它由甘草、小麦、甘草、甘草（蜜炒）和生姜组成。具有加热、补虚、和县快的功效。用于治疗中焦、虚寒、气血不足、伤寒的特点以及脾虚、腹痛、少阳邪郁结的人。在制备过程中，它强调甘草、温和、湿润的粘液和糖作为君主，加热和补充焦虑，缓解紧急情况，缓解疼痛。部长们用热和冷的桂枝温暖阳气，驱寒。酸甘白芍养阴解肝急，止痛止息，帮助生姜温胃解寒，枣脾益气补泻。六药的组合有利于温中、补虚、缓、精。它们具有柔肝健脾、益阴阳阳的功效，可以使中气健脾、祛邪理气、节约资金等。因此，它被称为“建中”。在本研究中，以中药白芍的主要有效成分作为测定含量的指标成分，通过薄扫描法测定了配合前后白芍药物和小建中汤中芍药物质的含量变化，以及小建中汤的合理性。 1 a/ja1004型 SCANNER-3型薄层扫描仪 (瑞士 CAMAG公司) , METTLER (梅特勒) -AB135-S十万分之一电子分析天平, FA/JA1004型万分之一电子天平;芍药苷对照品 (批号:0715-200211.含量测定用, 纯度98%, 中国药品生物制品检定所) .白芍、桂枝、甘草 (蜜炙) 均购自同仁堂药店, 经山西中医学院裴香萍副教授鉴定, 符合《中国药典》2010年版规定.大枣, 生姜, 饴糖均为市售. 乙醚, 正丁醇, 石油醚 (60～90 ℃) , 乙酸乙酯, 三氯甲烷, 甲醇, 浓氨试液, 甲酸, 冰醋酸等均为分析纯. 2 方法和结果 2.1 在薄梯度下的铬条件下 SCANNER-3型薄层扫描仪, 在λS=575 nm,λR=700 nm下扫描. 2.2 溶液制备 2.2.1 对照溶液的制备 精密称取芍药苷对照品适量, 用甲醇溶解制成每毫升含有芍药苷1.93 mg的对照品溶液. 2.2.2 供试液的制备 称量生姜4.5 g, 桂枝4.5 g, 炙甘草3.0 g, 大枣4.5 g (约2枚, 去核) , 白芍9.0 g于500 mL的烧杯里, 向其中加10倍量水 (255 mL) , 浸泡30 min, 第一次煎煮30 min, 纱布过滤, 滤渣和纱布一起用8倍量水204 mL再次煎煮20 min, 和前一次滤液一起减压抽滤得滤液, 加入饴糖15 g烊化, 浓缩至50 mL左右, 离心, 离心液定容至100 mL.移取20 mL, 用乙醚振摇提取3次, 每次15 mL, 弃去乙醚液, 再用水饱和正丁醇振摇提取4次, 每次15 mL, 合并正丁醇液, 用正丁醇饱和的水40 mL洗涤, 弃去水液, 正丁醇液蒸干, 残渣加甲醇1 mL溶解, 作为供试液. 2.2.3 白芍药溶液的制备 称取白芍药材9.0 g于500 mL的烧杯里, 向其中加入255 mL水, 按照“2.2.2”项方法制备, 得白芍样品溶液. 2.2.4 阴性样品溶液的制备 称取“2.2.2”项除白芍外的其他药材, 按相同的方法制备, 得缺白芍的阴性对照溶液. 3 芍药酚前后的含量测定 3.1 方法研究 3.1.1 线性范围的确定 取芍药苷对照品1, 2, 4, 6, 8, 10 μL, 照薄层色谱法 (附录VIB) 试验, 分别交叉点于同一于羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上, 以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶浓氨试液 (8∶1∶4∶1) 为展开剂展开、取出、晾干, 喷以5% 香草醛硫酸试液, 加热至斑点显色清晰.按照“2.1”项色谱条件扫描, 以峰面积Y对进样量X(μg) 进行回归处理, 得到芍药苷的回归方程为:Y=938.73X+286.36,r=0.997.芍药苷的线性范围为1.93～19.3 μg. 3.1.2 仪器精密度试验 取芍药苷对照品, 在同一块薄层板上点6个点, 均点样4 μL, 照薄层色谱法 (附录VIB)试验, 以三氯甲烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶浓氨试液 (8∶1∶4∶1) 为展开剂展开、取出、晾干, 喷以5%香草醛硫酸试液, 加热至斑点显色清晰.按照“2.1”项色谱条件扫描, 其峰面积的RSD=1.8%, 表明仪器精密度良好. 3.1.3 不同部位a 按处方精密称取生姜4.5 g, 桂枝4.5 g, 炙甘草3.0 g, 大枣4.5 g (去核) , 白芍9.0 g, 按“2.2.2”项方法制备小建中汤供试品溶液, 放置0, 3, 6, 9, 12, 24 h后, 按上述色谱条件进行TLC分析, 每次点样4 μL, 测定峰面积, 计算芍药苷含量.芍药苷含量的RSD=2.8% , 表明芍药苷在24 h内稳定. 3.1.4 小建中汤样品中关于茯苓含量测定2.2.5,5.5,5.5,5.5.5.5,5.5.5,5.5.5的测定 按小建中汤处方量 (生姜4.5 g, 桂枝4.5 g, 炙甘草3.0 g, 大枣4.5 g (去核) , 白芍9