第七章真核生物表达调控详解.pptVIP

5-甲基胞嘧啶在DNA上并不是随机分布的，基因的5 端和3 端往往富含甲基化位点，而启动区DNA分子上的甲基化密度与基因转录受抑制的程度密切相关。对于弱启动子来说，稀少的甲基化就能使其完全失去转录活性。当这一类启动子被增强时（带有增强子），即使不去甲基化也可以恢复其转录活性。若进一步提高甲基化密度，即使增强后的启动子仍无转录活性。因为甲基化对转录的抑制强度与MeCPl（methyl CpG-binding protein l）结合DNA的能力成正相关，甲基化CpG的密度和启动子强度之间的平衡决定了该启动子是否具有转录活性。 本文档共72页；当前第30页；编辑于星期三\9点41分 ．DNA甲基化与X染色体失活 X染色体失活是发育过程中独特的调节机制。 雌性胎生哺乳类动物细胞中两条X染色体之一在发育早期随机失活，以确保与只有一条X染色体的雄性个体内X染色体基因的剂量相同。一旦发生X染色体失活，这个信息便能够稳定地传递给子代细胞，使该细胞有丝分裂所产生的后代都保持同一条X染色体失活。 本文档共72页；当前第31页；编辑于星期三\9点41分 X染色体失活中心(X-chromosome inactivation center,Xic): Xist基因(Xi-specific transcript) Xist X染色体 其他位点 甲基化，不转录 活性 去甲基化，活性 去甲基化，转录 失活 甲基化，失活 本文档共72页；当前第32页；编辑于星期三\9点41分 7.2 真核基因转录水平的调控 真核基因调控主要也是在转录水平上进行的，受大量特定的顺式作用元件（cis-acting element，又称顺式作用元件）和反式作用因子（trans－acting factor，又称跨域作用因子）的调控，真核生物的转录调控大多数是通过顺式作用元件和反式作用因子复杂的相互作用来实现的。 　　 真核细胞的三种RNA聚合酶（Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ）中，只有RNA聚合酶Ⅱ能转录生成mRNA，以下主要讨论RNA聚合酶Ⅱ的转录调控。 I型： 45 S-rRNA II型： hnRNA III型： 小分子RNA（5S-rRNA，tRNA，snRNA） 本文档共72页；当前第33页；编辑于星期三\9点41分 1. 顺式作用元件(cis-acting elements) 　　真核基因的顺式调控元件是基因周围能与特异转录因子结合而影响转录的DNA序列。其中主要是起正调控作用的顺式作用元件，包括启动子(promoter)、增强子(enhancer)等；。 本文档共72页；当前第34页；编辑于星期三\9点41分 真核基因表达以正调控为主 　　真核RNA聚合酶对启动子的亲和力很低，基本上不能独靠其自身来起始转录，而是需要依赖多种激活蛋白的协同作用。 真核基因调控中虽然也发现有负性调控元件，但其存在并不普遍；真核基因转录表达的调控蛋白也有起阻遏和激活作用或兼有两种作用者，但总的是以激活蛋白的作用为主。 即多数真核基因在没有调控蛋白作用时是不转录的，需要表达时就要有激活的蛋白质来促进转录。 换言之：真核基因表达以正调控为主导。 本文档共72页；当前第35页；编辑于星期三\9点41分 （一） 顺式作用元件 真核生物DNA序列 和被转录的结构基因距离较近 包括：启动子（启动子上游近侧序列） 增强子 和转录调控有关(可影响自身编码基因表达活性) 真核基因转录激活调节 本文档共72页；当前第36页；编辑于星期三\9点41分 1. 启动子和启动子上游近侧序列 是RNA聚合酶结合位点周围的DNA序列 位于转录起始点的上游 按其对RNA聚合酶的影响分为两类: 位于较上游的元件，强烈影响转录起始 CAAT box ，GC box 离转录点较近，起转录起始调控作用 TATA box 真核基因启动子是RNA聚合酶结合位点周围的一组转录控制组件，至少包括一个转录起始点以及一个以上的功能组件 本文档共72页；当前第37页；编辑于星期三\9点41分 本文档共72页；当前第38页；编辑于星期三\9点41分 2.增强子 一类能增强真核生物启动子功能的顺式作用元件（DNA序列） 增强子、启动子交错覆盖/连续 没有增强子 启动子不表现活性 没有启动子 增强子无法发挥作用 增强子作用不受序列方向的制约 有组织特异性 本文档共72页；当前第39页；编辑于星期三\9点41分 3. 反应元件 真核细胞处于某一特定环境时 有反应的基因具有相同的顺式作用元件 这一类顺式作用元件--反应元件（DNA序列） 特点：（１）具较短的保守序列　　　（２）与转录起始点的距离不固定