多发性骨髓瘤遗传学检测专家共识中国抗癌协会血液肿瘤专业委员会、中华医学会血液学分会白血病淋巴瘤学组(发布时间：2019-02).pdfVIP

2022/12/6 多发性骨髓瘤遗传学检测专家共识中国抗癌协会血液肿瘤专业委员会、中华医学会血液学分会白血病淋巴瘤学组(发布时间：2019-02) 多发性骨髓瘤遗传学检测专家共识 中国抗癌协会血液肿瘤专业委员会、中华医学会血液学分会白血病淋巴瘤学组(发布时间：2019-02) 多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是一种高度异质性的血液系统肿瘤，患者生存时间存在较大差异。随着蛋白酶体抑制剂、免疫调节剂和新型单克隆抗体等新药的临床应用，MM患者的疗 效得到了显著的提高。根据MM的预后因素进行危险度分层，进行个体化治疗，有助于提高疗效、减轻治疗相关毒性。遗传学异常是MM危险度分层的基础 [1-2] ，遗传学异常的检测技术主要包括 染色体核型分析、荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization，FISH)、基因表达谱、二代测序和微阵列比较基因组杂交等[3]。基因芯片检测技术复杂、成本高，尚不适合临床常规开展。美 国国立综合癌症网络(National Comprehensive Cancer Network，NCCN)指南将染色体核型和FISH技术作为初诊MM的主要遗传学检测技术。FISH具有快速灵敏、特异性高、不需要中期分裂相 的特点，弥补了常规染色体核型检测需要中期分裂相、分辨率低的不足，成为MM遗传学检测的主要方法。近年来，虽然遗传学检测对于MM的重要意义已经取得共识，但国内MM遗传学检测存在 检测方法不规范、阳性阈值混乱、临床价值不明确等一系列问题，亟需进一步规范。为此我们制订了MM的遗传学检测专家共识，以规范国内MM的遗传学检测。 1 常规染色体核型分析 MM肿瘤细胞为终末分化细胞，增殖率较低，传统的染色体制备很难获得足够的分裂相，加之送检标本中肿瘤细胞比例较低，导致核型异常检出率低。我国来自52家医院672例MM患者标本的多中 心研究结果显示：常规染色体核型分析异常检出率为22.1%[4]。针对MM细胞增殖活性低的特点，染色体制备时可以采用细胞因子刺激MM细胞增殖，延长培养时间以期获得足够的中期分裂相。L ai等[5]采用细胞因子GM-CSF(30ng/mL)联合IL-6(2000U/mL)刺激6d培养法，对151例MM患者进行染色体核型分析，129例获得可分析的中期分裂相，其中66例(51%)发现克隆性染色体异常， 提示加入细胞因子和延长培养时间可能能够克服部分MM常规染色体核型分析异常检出率低的问题。 MM的核型改变多同时包含数量和结构改变的复杂核型异常。绝大多数为非整倍体核型，其中超二倍体(48～74条染色体)(30%～70%)，常伴有3、5、7、9、11、15、17和19号染色体三体，非超 二倍体(＜48或＞74条染色体)常伴有13、14、16和22号染色体缺失以及14q32易位。在常规核型分析中超二倍体患者对化疗敏感，预后较好；低二倍体是传统化疗和大剂量化疗联合自体造血干细 胞移植的预后不良因素。近来有研究者认为常规染色体分析发现del(13)而非FISH检测的del(13)是预后差的指标 [6]。 对于常规染色体核型分析，专家共识为：(1)MM常规染色体核型分析虽然有一定的局限性，但在MM预后判断中仍有一定价值，常规染色体核型分析仍是MM遗传学检测的方法之一；(2)建议采用 GM-CSF联合IL-6刺激6d培养法制备染色体标本，以期获得更多可供分析的分裂相。 2 FISH检测 2.1 FISH方法的选择 MM的FISH检测有其特殊性。与其他恶性血液疾病不同，许多MM患者的肿瘤细胞在骨髓中比例较低且分布不均匀，加之骨髓抽吸过程中会发生外周血的稀释，浆细胞比例在遗传学检测样本中的 比例一般仅占有核细胞的1%～20%。即使骨髓涂片中浆细胞比例较高的患者，遗传学检测样本中浆细胞比例仍然可能非常低。因此，对于MM进行FISH检测时，如何准确的识别肿瘤细胞而不被正 常细胞所干扰是首先需要解决的问题。应用FISH进行MM遗传学检测之前，需要进行浆细胞富集或者标记，而不能直接采用全骨髓标本进行FISH检测。如采用未经处理的骨髓标本进行FISH检测， 检测结果易受实验条件、检测人员等干扰，并且容易出现接近阈值的结果，难以判读。中国医学科学院血液病医院发现对MM患者骨髓标本经过CD138磁珠分选后进行FISH检测，浆细胞分选可以 [7]