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一种应用于真菌遗传转化的新方法 丝绸细菌与农业密切相关。有些细菌会导致农业疾病。此外，一些真菌具有控制植物病虫害的功能。因此，丝状真菌生物学的研究对农业的可持续发展具有重要意义。随着越来越多的真菌全基因序列测序成功,真菌生物学研究进入了功能基因组时代。反向遗传学方法是研究功能基因最直接简便的方法,该方法是通过遗传转化构建覆盖整个基因组的突变体库,大规模地从位点到表型分析基因的功能。 获得丝状真菌基因突变体较常用的转化技术包括限制性内切酶介导整合技术、转座子转化技术、脂质体转化法、电转化法,Ca Cl2-PEG转化法,这些方法为丝状真菌的功能基因研究提供了便捷,Iori等利用限制性内切酶介导的遗传转化建立了镰刀菌(Fusarium venenatum)的突变体库并分离克隆了有关镰刀菌产孢的REN和Fs To A基因。但是这些转化技术或需要制备原生质体、或转化效率低,阻碍了它们在研究丝状真菌功能基因中的应用。根癌农杆菌介导的遗传转化技术克服了这些缺点,为丝状真菌的遗传转化和功能基因研究提供了有力的工具。 1 农杆菌的遗传转化 根癌农杆菌是革兰氏阴性土壤杆菌,自然情况下它可通过伤口侵入植物导致受伤部位产生瘿瘤,并将其T-DNA序列转入植物细胞并整合到植物染色体上,利用这一原理得到第一批能表达外源基因的转基因植物。Paul Bundock等(1995年)发现根癌农杆菌可以转化酿酒酵母(S