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曼陀罗不同部位提取液对菜青虫的触杀和拒食作用
曼陀罗是茄子科的一种广泛分布于全国各地的植物。曼陀罗具有多种生物活性,其茎、叶和果实对各种农业害虫都有毒杀效果。这是一种很好的害虫植物[10,11,12,13,14和15]。关于曼陀罗对粘虫和菜绿昆虫的接触、付款和排斥效果,中国没有报道。在这项工作中,我们研究了四种曼陀罗对粘虫和菜绿昆虫的接触、喂食和排斥作用,以充分利用曼陀罗植物资源。
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.1.1 样品来源和采集
曼陀罗(D.stramonium)、紫花曼陀罗(D.tatula)、毛曼陀罗(D.innoxia)和重瓣曼陀罗(D.fastuosa).
4种曼陀罗初花期根茎叶、花和成熟期种子均采自甘肃省兰州市榆中县良种繁殖场,人工种植.样品在室内阴干,粉碎过40目筛,在室温下保存备用.
1.1.2 甘蓝菜地pierisrapae
粘虫(Mytimna separate)采自榆中县良种繁殖场小麦田,于室内用玉米叶或小麦苗连续饲养供试.菜青虫(Pieris rapae)采自兰州市崔家庄未施药的甘蓝菜地,于室内用甘蓝叶或苗连续饲养供试.
1.1.3 试验溶剂
除丙酮、乙酸乙酯和无水乙醇为分析纯外,其他溶剂均为工业级.
1.2 测试方法
1.2.1 滤渣的预处理
采用冷浸渍法提取.称取粉碎后的植物样品各50 g,置于棕色广口瓶中,加入500 mL溶剂(甲醇、乙醇、丙醇、石油醚、乙酸乙酯)浸泡72 h,过滤后收集滤液;滤渣继续用相应溶剂浸泡48 h,过滤后收集滤液;滤渣再用相应溶剂浸泡24 h,过滤后收集滤液,弃除残渣,合并3次滤液.滤液经RE-52AA型旋转蒸发仪减压蒸馏(-0.01 Pa,45 ℃)至干为粗提物.用甲醇(分析纯)溶解并定溶到50 mL,相当于干样品1 g/mL的质量浓度,在2 ℃冰箱中保存备用.生物测定前加入1 %的表面活性剂JFC(C7~C9烷醇聚氧乙烯醚).
1.2.2 玉米叶片的消毒处理
采用虫体浸渍法.粗提物用水稀释成5倍液,剂量相当于0.2 g干粉/mL.挑选大小一致的粘虫5龄初期幼虫,在药液中浸渍3 s,取出后用滤纸吸去多余药液,然后放入直径12 cm铺有滤纸保湿的培养皿中,饲喂新鲜玉米叶片.每处理至少25头幼虫,重复4次.以甲醇+JFC用水稀释成5倍液浸渍处理作为对照.在温度(25±1)℃、湿度60 %~80 %、光照L∶D=14∶10条件下饲养,视取食情况及时添加玉米叶片.24 h后调查死亡数,计算死亡率和校正死亡率.
1.2.3 调查和饲养蓝水势干虫的死亡率和校正死亡率.
采用虫体浸渍法.粗提物用水稀释成10倍液,剂量相当于0.1 g干粉/mL.挑选大小一致的4龄初期菜青虫,在药液中浸渍3 s,取出后用滤纸吸去多余药液,然后放入直径12 cm铺有滤纸保湿的培养皿中,饲喂新鲜甘蓝叶片.每处理10头幼虫,重复4次.饲养条件同上1.2.2.24 h时后调查死亡数,计算死亡率和校正死亡率.
1.2.4 叶蝶保水性测定
采用浸渍叶碟法.从田间采集玉米叶片,用剪刀剪成4 cm×6 cm的叶碟.粗提物用水稀释成5倍液,剂量相当于0.2 g干粉/mL.将叶碟在药液中浸渍3 s,取出晾干后放入直径为9 cm铺有滤纸保湿的培养皿中,每皿放入2张叶碟.挑选粘虫4龄初期幼虫,饥饿4 h后放入加有叶碟的培养皿中,每皿放入1头,累计处理12头试虫,以甲醇+JFC用水稀释成5倍液浸渍叶蝶处理作为对照.48 h后用LI-3000型叶面积测定仪测定剩余叶面积,统计取食量,计算拒食率.拒食率(%)=[(对照平均取食量-处理平均取食量)/对照平均取食量]×100.
1.2.5 拒食作用测定
采用叶片浸渍法.从田间采回大小一致的新鲜甘蓝叶片,在粗提物原液中浸渍2~3 s,自然晾干后单张叶片放入直径12 cm铺有滤纸保湿的培养皿中.挑选健壮、大小一致饥饿4 h的3龄初期菜青虫,每皿放入1头,每处理3头试虫,重复4次.以甲醇+JFC原液浸渍处理作为对照.饲养条件同上.48 h后检查取食情况,用坐标纸测定被取食的叶片面积,初步判断拒食作用的强弱.菜青虫拒食作用强弱的判断标准为:拒食作用强,取食叶面积在10 %以下;拒食作用较强,取食叶面积在11 %~25 %;拒食作用一般,取食叶面积在26 %~50 %;拒食作用差,取食叶面积在51 %~90 %;无拒食作用,取食叶面积在91 %以上.
对拒食作用表现出强和较强的菜青虫进一步测定其拒食率.采用浸渍叶碟法测定.从田间采回新鲜甘蓝叶片,制成直径3 cm的叶碟,在粗提物原液中浸渍2~3 s,自然晾干后每2片叶蝶放入直径12 cm铺有滤纸保湿的培养皿中.挑选健壮、大小一致饥饿4 h的3龄初期菜青虫,每皿放入1头,每处理3头试虫,重复4次.以甲醇+JFC原液浸渍处理作为对照.饲
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