基于MOF的比率荧光探针的制备及应用.pdf

摘要

荧光探针具有灵敏度高、检出限低、选择性好、线性范围宽等优势，因而

在科学界引起了极大的关注。其中，比率型荧光探针通过记录两种不同波长的

荧光强度比来实现目标分析物的检测，引发了科学研究者们对复杂样品分析的

广泛兴趣。相对于单信号荧光探针，比率荧光检测能有效减少或消除外界因素，

如仪器参数、环境变化、探针分子的局部浓度等，对测量结果的影响。但是，

比率荧光探针的构建一直是一个难题，传统的构建方式主要是利用共价结合的

方式实现的，这样的结合虽然紧密，但步骤繁琐、冗长，且荧光分子可能在连

接过程中受到一定损坏。金属有机框架(Metal-organicframework,MOF)因具有较

大的孔隙率与比表面积、优异自适应组装能力、以及丰富的官能团等优势，被

广泛应用于各个领域。本论文结合MOF的自适应组装能力、丰富的官能团等优

异性能，制备了一系列比率荧光探针，并对其荧光传感性能进行了研究。主要

工作如下：

（1）我们制备了基于Zn-MOF的比率荧光探针Ru(bpy)32+/ThT@Zn-

MOF(TzRu)，并实现了对有机磷农药(OPs)的可视化检测。我们利用Zn-MOF将

硫黄素T(ThT)包埋，制备ThT@Zn-MOF复合物。随后，我们利用静电作用将

钌吡啶(Ru(bpy)32+)与ThT@Zn-MOF结合构建比率荧光探针(TzRu)。研究发现，

ThT被包埋后，荧光性能得到显著提高；在酸性条件下ThT@Zn-MOF会发生裂

解，造成ThT泄露，荧光猝灭，在此过程中RU的荧光性能不变化。有机磷(OPs)

能抑制乙酰胆碱酶(AChE)活性，阻止其催化乙酰胆碱(ATCl)水解产生乙酸。因

此，我们能利用TzRu为探针检测OPs。在此基础上，为了进一步简化对OPs的

检测过程，我们利用琼脂糖凝胶(AG)将TzRu探针固定在离心管盖上，构建了一

个便携式试剂盒。利用智能手机与智能软件，对试剂盒信号进行分析处理，并

实现了对苹果汁中OPs的检测。

（2）我们利用DNA整合的MOF制备了比例荧光探针T-DNA/

Ru(bpy)32+@UiO-66(RUT)，并实现了对汞离子的检测。我们选择由Zr4+与对苯

二甲酸(PTA)组成的Zr-MOF(UiO-66)为载体，利用一锅法将钌吡啶(Ru(bpy)32+)

包埋在Zr-MOF内制备Ru(bpy)32+@UiO-66复合材料(RU)。同时，我们利用Zr4+

离子与磷酸根的特异性结合的特性(Zr-O-P键)，在RU上修饰一条富含胸腺嘧啶

碱基的单链DNA(T-DNA)，构建了一个“turn-on”比率荧光探针RUT。T-DNA

I

在Hg2+的作用下(T-Hg2+-T)会折叠成双链，能与SYBRGreenⅠ(SG-Ⅰ)染料结合发

出强烈荧光，在此过程中RU的荧光性能不变化。基于以上原理，我们能利用

TRU实现对Hg2+的比率荧光检测。

（3）我们利用基于适配体整合的MOF制备了比率荧光探针SG-Ⅰ/a-DNA/c-

DNA/Ru(bpy)32+@UiO-66(RUDS)，并实现了对ATP的检测。我们通过一锅法合

成Ru(bpy)32+@UiO-66(RU)作为参比信号，随后在复合物上修饰与SYBRGreen

Ⅰ(SG-Ⅰ)染料结合的双链适配体(DS)，合成了一个“turn-off”比率荧光探针

RUDS。适配体对ATP具有响应性，会与ATP特异性结合造成双链解旋为单链。

这将造成SG-Ⅰ释放和荧光猝灭，在此过程中RU的荧光性能不变化。因此，我

们实现了利用RUDS对ATP的检测。由于ATP是细菌的标志性物质之一，我们

还探究了利用该探针对细菌检测的可行性，并取得了一定的成果。

关键词：比率荧光探针；金属有机框架；有机磷；汞离子；三磷酸腺苷

II

目录

摘要I

AbstractIII

目录V

第一章绪论1

1.1荧光探针1

1.1.1荧