DNA的提取技术完整版.pptxVIP

DNA的提取;¨鉴于从现场收集的麻风标本多为全血，皮肤活检标本，鼻拭子，因此着重介绍从全血，皮肤活检标本中提取DNA的方法。;实验一

皮肤组织中的DNA的提取;¨实验目的：掌握从皮肤组织中提取麻风基因组DNA的方法;¨商品化的试剂盒不需要酚/氯仿纯化，乙醇沉淀，而是将皮肤组织经裂解液裂解，将裂解后的液体进入含硅藻滤膜的纯化柱，基因组DNA被吸附，洗液穿过纯化柱被抽走。这种方法具有快速，简便，安全的优势。;方法一：;实验材料

—试剂盒成分:QIAampDNABloodMiniKit;二，其他试剂，仪器及耗材;实验步骤;¨消化样本

将肉泥状的皮肤组织放入EP管中，加入消化液ATL180ul和蛋白酶K20ul,55℃消化大约72h，期间用旋涡混合器振荡混合助溶。消化好的样本成清亮透明。;加入200ul的溶液AL，旋涡混合均匀

70℃孵育10min,加热灭活蛋白酶K

加入200ul的（96-100%）的乙醇，旋涡混合数秒轻轻的将离心管内的混合物转移到

离心柱内（切勿接触到离心柱沿），

盖上管盖，8000rpm离心1分钟;将离心柱置于一个干净的2ml收集管内，将含有过滤物的旧管丢弃

加入500ul的溶液AW1，8000rpm离心1分钟

将离心柱置于一个干净的2ml收集管内，将含有过滤物的旧管丢弃;加入500ul的溶液AW2，14000rpm离心3分钟;洗脱