蛋白纯化流程.docxVIP

走着，看着，身边的故事是否能“联到你生活里不经意间的感!触；

听着，学着，那些零碎的知识是否“联到你科研里正在探索的实验；

―免戒们的科研一点琳，一点活跃

知识公园里设计着一位主角，那棵树，笔直的干、侧伸的斜枝是思维的框架，“联着”地下，伸向天空。科研的思维总在不断地规划、设计，梳理知识，以备清晰行动。在设计的流程中不断的吸收新的知识，枝繁叶茂，丰富主干，正如条条大路通罗马，思维也会随之活跃，路也会更加灵活。

而今天，我们所要梳理的主干，是蛋白纯化的知识流程，即蛋白纯化的基本策略，愿这些简单的知识点归类能够联到你的科研思维。

蛋白雄化婀三倒备

前奏：释放蛋白，目标：浓缩捕获蛋白；

间奏：粗分离蛋白，主要利用离心、沉淀、萃取等方法将蛋白和细胞中的其他成分（DNA、RNA等）物质进行分离。

主旋律：精细纯化蛋白，去除蛋白质分子量比较接近的蛋白以及痕量杂质。

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蛋白质纯化泳层析淀有机溶剂沉粗分离蛋白离沉淀法萃取、透析人凝胶过滤层析

蛋白质纯化

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层析

淀有机溶剂沉

粗分离蛋白

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沉淀法

萃取、透析

人

凝胶过滤层析

我们需要根据目标蛋白质的各种性质选择合适的蛋白纯化方法。

亲和层析因其高分辨率的特点，常用于精制纯化蛋白，根据目标蛋白与配体之间特异性结合的能力、重组标签蛋白螯合金属离子的能力、带有糖基化修饰蛋白可于外源