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WatersAcquityUPLC超超⾼⾼效效液液相相⾊⾊谱谱仪仪

1.0⽬的

为了指导实验分析员在实验⼯作中正确使⽤WatersAcquityUPLC超⾼效液相⾊谱仪，特制定规程。

2.0范围

适⽤于指导实验⼈员在实验⼯作中对WatersAcquityUPLC超⾼效液相⾊谱仪的操作。

3.0职责

3.1实验⼈员在实验⼯作中使⽤WatersAcquityUPLC超⾼效液相⾊谱仪时应遵循

规程。

3.2部门负责⼈负责审核规程并保证其实施。

3.3QC部门负责⽇常运⾏的监管。

4.0操作规程

4.1试剂准备

使⽤⾊谱纯试剂配制的流动相和清洗液.强洗针液⽤较⾼⽐例的甲醇或⼄腈的⽔溶液(如80/20),弱洗针液⽤纯⽔或含少量甲醇或

⼄腈的⽔溶液(如10/90),清洗柱塞密封垫（SeaWash）溶液应使⽤纯⽔或5%～10%甲醇溶液。

4.2液相开机

4.2.1先打开UPLC所有模块电源（最后打开SO（SampeOrganizer）电源），打开Anaystsoftware，点击ACQUITYConsoe

进⼊液相控制界⾯，图1。

图1

4.2.2连接液相

4.2.2.1⾃动启动液相：点击system，点击contro，选择startupsystem，弹出图2控制界⾯，依次选择需要执⾏的项⽬。

PrimeSovents中选择需要进⾏SM（SampeManger）和BSM（BinarySoventManager）的相关项⽬。依次在Opitona和

EquiibratetoMethod中按实验

需要进⾏设置。然后点击start，仪器⾃动进⾏清洗等准备⼯作。如果BSM,SM,SO等显⽰

红⾊字体，说明仪器和软件连接失败，分别点击contro，reset相关部分。

图2

4.2.2.2连接液相各个部分（如果BSM,SM,SO等显⽰红⾊字体，说明仪器和软件连接失败，分别点击contro，reset）。选择

BSM，点击contro，选择Primeseawash，进⾏柱塞杆的

清洗。然后选择PrimeA/BSovents，选择A1（或A2）、B1（或B2）进⾏溶剂脱⽓操作，

时间设定

5min，

Prime时

流速已设

定，⽆需

改动，脱

⽓时

Degasser

的压⼒

1psi。见

图3。

图3

选择BSM，点击contro，分别选择Primesyringes，Washneede清洗注射器和进样针，见图4。在Numberofcyces中输⼊要灌

注的次数（进⾏5次左右的灌注），点击OK。

图4

4.2.3配置SO：在SM中选择Configure，选择SampeOrganizer，在弹出的窗⼝选择SO，见图5。在Patesetup中可以设置SO

中的样品盘类型，见图6。

图5

图6

在SO中选择Configure，选择Scanandstoreshefayout，SO进⾏样品盘扫描，⾃动识别样品盘类型，如果识别错误，继续执

⾏该步骤。勾选Disabeshefcheck可以禁⽌SO进⾏

再次扫描，在样品盘类型识别并设定⽆误情况下使⽤，见图7。在图7右侧的temperature中设定SO的内部温度。

图7

4.2.4⾊谱柱信息，见图8，在此设置柱温箱温度，查看⾊谱柱相关信息。

图8

4.3定量环的更换

选择所需更换的定量环，在SM右侧的六通阀上更换。然后在SM中选择Maintain中选择Repace，点击Sampesyringe，点击

OK，见图9。此时注射器柱塞杆下降到指定位置，拧下固定螺丝，取下注射器。安装新的注射器，点击reset。在Configure中

选择VoumeConfigure设置新更换的定量环和注射器体积，见图10。然后选择Primesyringes，进⾏注射器灌注，直到注射器

中没有⽓泡存在。再次选择Maintain中选择Leaktest，点击Sampesyringe，点击OK，进⾏检漏测试。测试通过，定量环及注

射器更换完成（waters的不同体积定量环对应特定体积的注射器，不能混⽤）。

更换新的定量环需要进⾏体积校准，在Maintain中选择Characterize，点击CharacterizeNeedeandLoopVoumes，点击

start，见图11。如果测试失败，检查oop和sypinge是否漏液，再次执⾏灌注oop和sypinge，然后重新进⾏体积测试。测试

pass，定量环更换完成。

图9

图10

图11

4.4液相报错信息，点击Logs，显⽰相关报错信息，见图12。