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一株高效解钾菌的筛选

谭康;吴泽英;顾永丽;周娟;杨友联;吴汉福

【摘要】为开发微生物解钾菌肥料，采用钾长石为唯一钾源的选择性培养基从贵州六盘水玉米地土壤分离初筛得到11株解钾菌.通过摇瓶释钾及火焰分光光度计测钾含量，复筛得到高效解钾菌株1株(LPSU2015K5),解钾率为1.84%.形态及革兰氏染色观察表明菌株LPSU2015K5具有荚膜，为革兰氏阴性杆菌.

【期刊名称】《六盘水师范学院学报》【年(卷)，期】2018(030)003【总页数】4页(P52-55)【关键词】解钾菌;筛选;解钾能力【作者】谭康;吴泽英;顾永丽;周娟;杨友联;吴汉福

【作者单位】六盘水师范学院生物科学与技术学院，贵州六盘水553001;六盘水师范学院生物科学与技术学院，贵州六盘水553001;六盘水师范学院生物科学与技术学院，贵州六盘水553001;六盘水师范学院生物科学与技术学院，贵州六盘水553001;六盘水师范学院生物科学与技术学院，贵州六盘水553001;六盘水师范学院化学与材料工程学院，贵州六盘水553001【正文语种】中文

【中图分类】S154.3

钾可以增进作物的抗病、抗逆性，是农作物必需的基本营养元素之一。但我国能被利用的钾资源非常贫乏，已被发现的储量仅占全世界储量的0.66%。可利用钾资源储量少［1］，导致我国约有七成的耕地钾贫乏，成了制约我国农作物品质改善、产量提高的重要因素［2］。虽然有效钾含量较少，但我国拥有丰富的、以钾长石为主的难溶性硅铝酸钾矿产资源。因此有效的开发钾长石资源是解决农业生产中可溶性钾匮乏问题的重要方法和途径。

钾细菌，又称硅酸盐细菌(Silicatebacteria)，是能将土壤中难溶性的钾转变为可溶性状态，供给植物生长发育用的一类微生物［3］。人们试图从高效解钾菌株的分离和选育［4］中开辟一条将难溶性的钾转变为可溶性状态的解决途径。为此，本研究从贵州六盘水地区长期耕作的玉米地土壤样品中分离筛选具有解钾活性的菌株，以期为深入研究钾细菌在难溶性钾矿物分解中的作用，以及开发微生物解钾菌

肥料奠定基础。

1研究方法1.1培养基

所用的初筛培养基为解钾培养基［5］，保存培养基为牛肉膏蛋白腺培养基［5］,复筛培养基为种子液培养基［6］和缺钾液体培养基［7］，各培养基成分如表1。表1培养基及成分注：钾长石粉过1000目，后用去离子水浸泡过夜，再反复冲洗，最后阴干备用培养基种类各成分参数初筛培养基蔗糖5.0gNa2HPO42.0gMgSO4?7H2O5.0mgFeCl35.0mgCaCO30.1g钾长石粉1.0g琼脂20gpH7.0—7.5去离子水1000ml保存培养基牛肉膏5.0g蛋白腺10.0gNaCl5.0g琼脂20gpH7.2—7.4蒸馏水1000ml种子液培养基蔗糖10gCaCO31.0gMgSO4?7H2O0.5g(NH4)2SO41.0gNaCl0.1g酵母膏0.5gK2HPO42.0gpH7.4去离子水1000ml缺钾液体培养基蔗糖10gNa2HPO42.0gMgSO4?7H2O0.5g(NH4)2SO41.0gNaCl0.1g酵母膏0.5g钾长石粉10gpH7.2—7.4去离子水1000ml

1.2主要试剂与仪器

AA—7003型火焰原子吸收分光光度计（北京东西分析仪器有限公司），722型可见分光光度计（杭州科晓化工仪器设备有限公司），TDZ5型台式低速离心机（湖南赫西仪器装备有限公司），BX51型研究级正置显微镜分析系统（日本），GenPure型超纯水系统（赛默飞世尔科技旗下公司），钾长石粉（中国地质大学），所用其他试剂均为国产分析纯。

1.3实验方法

1.3.1样品采集

采用三点取样法采集，选用长期耕种玉米的土壤，用小铲铲除表层土壤，取10~20cm之间土层的土壤，分别装入无菌信封中，贴上标签，带回实验室，于冰箱内4C暂存备用。

1.3.2目的菌株的分离与保存

将采集得到的土壤样品充分混匀后，从混匀的样品中取出10g放入装有玻璃珠和250ml无菌水的锥形瓶中，旋转振荡约20min，使土壤中的微生物得以充分分散，并通过逐步稀释制备成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5稀释梯度的菌悬液，在无菌操作条件下各取0.2ml菌悬液于初筛培养基，涂布均匀，每个稀释梯度3个重复，并倒置于28C恒温箱中培养3~5d。待菌落长成后，观察菌落的形态特征。根据菌落的大小、表面及边缘形状、透明程度和菌落颜色等形态差异，选择生长良好、菌落特征形态差异较大的代表性菌落在初