神经毒理学方法专家讲座.pptxVIP

神经毒理学方法;神经毒理学;;传统毒理学研究方法;;神经毒理学研究方法;神经行为功效评价方法;详细方法以下：;二、神经行为功效测试组合

1、FIOH测试组合（Finland‘sInstituteofOccupationalHealth,芬兰职业卫生研究所）测试组合

2、WHO-NCTB测试组合WHO选定神经行为关键测试组合（neurobehavioralcoretestbattery,NCTB）

3、NES方法神经行为评价系统(neurobehavioralevaluationsystem)是1986年Lets和Baker提出一组利用计算机进行测试测试组合。;三、学习和记忆功效测试

（一）、人体试验

韦克斯勒记忆量表、韦克斯勒成人智力量表和临床记忆量表主要用来测试人认知和记忆能力。

（二）、动物试验

1、小鼠Y型迷宫试验

2、小鼠跳台试验

3、小鼠避暗试验

4、大鼠穿梭试验（双向回避试验）

5、小鼠水迷宫试验;四、运动功效测试

（一）、人体试验

手提转速度试验目标瞄准追击试验简单反应时间试验

（二）、动物试验

活动度测定运动协调功效测试痛觉测定;神经毒性评价方法;可使用光镜、电镜、激光扫描共聚焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交法，受体定位法、荧光素示踪技术和放射性核素示踪技术对神经系统进行形态学观察和功效活动形态定位。

如：1998年阮素云报道了低浓度铅对大鼠血脑屏障超微结构损害；年赫秋月报道了丙烯酰胺对小鼠小脑浦肯野细胞病理改变；年杨芳报道不一样浓度锂对大鼠原代培养大脑皮层神经元影响。

;二、生理与生物化学方法

当前应用脑内微透技术，微穿技术，磁共振光谱技术，高效液相色谱法，免疫印迹法，放射免疫分析法等测定神经中枢神经递质释放量及其改变。

如：年李红玉报道了电磁辐射对大鼠海马氨基酸类神经递质水平影响；胡卫萱报道了甲基汞对脑组织有极大亲和性，年Yumi等发觉组氨酸可降低脑水肿面积增加

;三、神经电生理学方法

神经电生理学指标在试验和人群临床研究中都得到了较为广发应用，可使用脑电图，感觉诱发电位，肌电图等测试神经系统电活动，离体单个神经细胞可用斑片钳和膜片钳技术评价单???细胞单个离子通道及其受体电活动。

如：年阮迪云应用膜片钳技术和原位杂交技术研究了铅对钾通道亚单位和NMDA受体亚单位影响；年桑楠等报道了二氧化硫衍生物对大鼠海马神经元外向钾电流特征影响。

;四、分子生物学方法

神经生物学研究中惯用分子生物学方法有基因分子克隆，克隆后基因在人工体外系统或细胞中表示，PCR扩增核酸分子技术，原位杂交技术，基因芯片等。

如：年张增利报道了农药对小鼠脑细胞组织c-fos、c-jun、mRNA表示影响；年逯晓波报道了铅对幼鼠海马区Bcl-2、Fas蛋白表示影响；年丁晓蓉综述了基因芯片与脑衰老研究进展。;五、脑成像技术

脑成像技术很多，有颅骨X射线成像技术、同位素脑扫描、计算机断层扫描、核磁共振成像、正电子发射断层扫描术及单光子发射计算机断层摄影等。

如1997年姜锋杰报道了慢性锰中毒颅脑CT改变，为锰中毒诊疗提供了新参考依据。;行为发育毒性测试方法;

能够说，神经毒理学研究方法很多，任何研究神经科学方法如神经生物学、神经生理学、神经生化学、神经病理学、神经药理学、分子神经生物学等方法都适合用于神经毒理学。;

虽说神经毒理学研究方法很多，不过这些方法是互为补充，有些指标也只有在结合其它相关指标时才能很好地给予解释，实际上，因为神经系统复杂性，单一指标是不可能全方面评价神经毒性，所以将不一样指标组合起来进行成套试验是神经毒性评价主要研究方向。;另外，我个人认为神经毒理学研究方法还可依据试验样本起源分为：

一、人体研究

二、动物试验

三、离体组织或细胞试验;就人体研究而言，其研究方法与动物试验，离体试验有显著不一样，除了对一些特殊志愿者研究外，全部神经毒效应不能采取人体进行研究。只能在接触一些神经毒物或中毒后进行一些神经系统功效临床观察和检测；测定外周血、尿等替换指标，作为评价接触神经毒物生物标志物；死后组织病理学检验。;动物试验和离体试验研究和应用应恪守优化、降低及替换（refinement、reduction、replacement）3R标