化学品 丽斑麻蜥急性经口毒性试验 征求意见稿.docx

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化学品丽斑麻蜥急性经口毒性试验

1范围

本文件规定了化学品对丽斑麻蜥急性经口毒性试验的测定方法，包括试验的材料、条件、

操作、质量控制、数据处理、试验报告等的基本要求。

2术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

2.1半数致死剂量medianlethaldose

在急性经口毒性试验中，引起50%的供试生物死亡时的供试物剂量，用LD50（mg/kg

体重）表示。

2.2急性毒性acutetoxicity

是指生物体短时间（天）暴露于某种化学物质中产生的明显不良反应。在本试验中，丽斑麻蜥急性经口毒性用半数致死剂量(LD50)来表示，即在特定时间内（7d）导致50%数量的

供试蜥蜴死亡的供试物浓度。

2.3供试物testsubstances

试验中需要测试的物质。

2.4化学品chemicals

化学品是指各种元素组成的纯净物和混合物，无论是天然的还是人造的。

3方法原理

将不同浓度的供试物以一次经口灌注的方法暴露给丽斑麻蜥，以7d为一试验周期，记录丽斑麻蜥的死亡情况，确定50%试验丽斑麻蜥死亡时的供试物剂量，用LD50（mg/kg体重）

表示。

4试剂和材料

4.1供试生物

试验应选择同一种群、体长、体重和年龄相似的丽斑麻蜥（Eremiasargus）成年蜥蜴。试验用丽斑麻蜥体重变异系数不超过平均体重的20%。试验前至少需要驯养7d，驯养条件

和照明条件与试验时的条件一致。驯养期间死亡率小于5%，且生长状态符合物种生长规律

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视为健康良好，可用于后续试验。雌性丽斑麻蜥用于试验不能在其繁殖期。丽斑麻蜥驯养环

境参数见附录A。

4.2试剂

丽斑麻蜥的饮水可使用自来水。

配置不同浓度供试物溶液过程中的溶剂一般选择水(GB/T6682-2008规定的实验室一级用水)或者食用油(例如玉米油)。试验用水的pH值应为6.5-8.5。试验期间水质保持恒定。对于难溶于水或者油的供试物，可使用少量对丽斑麻蜥毒性小的有机溶剂助溶，例如乙醇，二甲基亚砜等，其中有机溶剂用量一般不得超过0.1mL/L(0.1%),用前应了解溶剂的毒理学特性。若助溶剂仍然无法满足溶解要求，可将供试物研磨成粉末，用水或者食用油配制

成悬浮液。

4.3饲喂材料

驯养和试验期间可用黄粉虫幼虫(TemebriomolitorL.)饲喂蜥蜴。

5仪器和设备

5.1试验容器

选择合适的容器进行试验，每个容器应容纳10只蜥蜴，可选择在30cm×30cm×20

cm的玻璃缸中进行。试验前应该彻底清洗，干燥后备用。

5.2仪器设备

量筒、容量瓶、小烧杯、分析天平、温湿度仪、微量进样针。

6样品制备

将一定量的供试物溶于一定体积溶剂中配制贮备液。贮备液应当天配制，对于化学性质较稳定的物质，可配制供两天以上使用的溶液，配好后4℃保存。对于水溶解度低的物质，可使用超声波分散混匀，也可使用少量有机助溶剂(助溶剂用量一般不超过0.1mL/L)。贮备液的配制推荐使用机械方式(如搅拌或超声),使供试物在溶剂中进行简单的混合或搅动。

通过稀释贮备液来配制所选定浓度的试验溶液。

7试验步骤

7.1试验条件

试验温度控制在26℃—30℃,湿度控制在50%—70%,光暗比为14h:10h的环境中进

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行。

饲养：试验开始24h前停止喂食，仅供清水，实验开始后正常饲喂面包虫。

7.2预试验

正式试验前先进行预实验，按正式试验的条件，以较大的间距设置4～5个浓度组，求

出供试物对供试蜥蜴的最低全致死浓度和最高全存活浓度，在此范围内设置正式试验的浓度。

7.3正式试验

根据预试验确定的浓度范围按一定间距设置5～7个剂量组，使死亡率分布在0%-100%之间。每剂量组10只蜥蜴(雌雄各半),并设空白对照组，使用助溶剂的还需增设溶剂对照组。对照组和各剂量组均不设重复，各浓度组间的浓度级差不得超过2倍。试验用蜥蜴以经口灌注法一次性给药5μL～10μL/g体重，给药步骤具体如下：将一定体积供试物吸入微量进样针，用手指刺激蜥蜴喉咙处肌肉使其张开嘴巴，迅速将进样针内的药品注入蜥蜴口腔后部但是不穿过喉咙。连续7d观察试验用蜥蜴的死亡情况与中毒症状，试验期间正常饲喂。

记录各处理组供试蜥蜴的死亡数，对试验数据进行数理统计，求出LD值及95%置信限。

7.4限度试验

在本标准规定的试验条件下，设置上限剂量为2000mg/kg体重，即在供试物浓度达2000mg/kg体重时仍未出现蜥蜴死亡，则无需继续试验，即可判定供试物对蜥蜴的经口毒性为低

毒。

8结果计算与表示

蜥蜴急性经口毒性半数致死剂量LD。的计算可采用直线内插法或概率单位图解法估算，

也