医院疟疾检测相关知识要点.docx

疟疾实验室检测相关知识要点

RDT（RapidDiagnosticTest）快检：（万孚疟原虫检测试剂）

1、需要全血（抗凝血）

2、检测的是疟原虫抗原（乳酸脱氢酶）

3、吸取5μl全血样本垂直滴加于加样孔(A孔)中,再滴加4滴裂解液于加样孔(B孔)中，15分钟内观察显示结果；30分钟后显示的结果无临床意义。

4、结果判读

血片的制作：

1、先标记，再制作厚血膜，最后制作薄血膜（血片从右至左依次是编号、厚血膜、薄血膜）

2、厚血膜用血量4-5ul（火柴头大小），由里向外一个方向旋转2~4圈，涂成直径0.8~1厘米大小的圆形。厚度以1个油镜视野可见到5~10个白细胞为宜

3、薄血膜用血量1-1.5ul，当血液在载玻片与推片之间向两侧扩展至约2cm宽时，使2张玻片保持25°~35°，从右向左迅速向前推成舌状薄血膜。

4、

5、染色：采用吉姆萨染液，先用甲醇固定薄血膜，再用蒸馏水溶解厚血膜（若是新鲜制作的血膜可免去此步）。按3%比例配制吉氏染液，染色时间约30min。（若有商品化染液试剂，可参照说明书推荐的稀释浓度和染色时间）

血片的镜检要点：

1、采用100倍油镜镜检疟原虫，先看厚血膜，再看薄血膜

2、厚血膜优点：用血量多，检出率高；缺点：细胞重叠，致虫体皱缩，空泡消失，胞浆变形，红细胞被溶解，虫种鉴定比薄血膜困难

薄血膜优点：原虫着色良好，结构清晰完整、便于形态鉴别虫种；缺点：原虫密度较低时，容易漏检

3、四种疟原虫鉴别要点：

间日疟：（1）：被寄生红细胞明显胀大，可达正常红细胞的1.5-2倍

（2）：滋养体胞浆有阿米巴样伪足，胞浆丰富且非常活跃，常见空泡

（3）：成熟裂殖体约含12-24个裂殖子（相比其他虫种裂殖子数目较多）

恶性疟：（1）：血片中只有环状体和配子体期原虫（大多时候只见环状体）

（2）：配子体呈新月形或腊肠形

（3）常见多重感染，即一个红细胞内寄生2个及以上环状体；有时环状体内可有2个核；环状体常贴在红细胞边缘寄生

卵形疟：（1）：被寄生红细胞正常或略胀大（胀大程度没有间日疟明显）

（2）：虫体呈椭圆形，常有毛刺，锯齿状；彗星状；伞矢状；拖尾等

（3）：滋养体对比间日疟，明显更加紧凑厚实

（4）：成熟裂殖体约含6-12个裂殖子（裂殖子数目比间日疟少，且虫体整体比间日疟小）

三日疟：（1）：被寄生红细胞不胀大或常常缩小

（2）：滋养体胞浆不活跃，较厚实

（3）成熟裂殖体呈菊花状，内含6-12个裂殖子