原创力文档- 1、本文档共66页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
内蒙古大学硕士学位论文
基于色谱一质谱联用技术的HeLa细胞表观转录组定量分析研究
摘要
表观转录组学作为表观遗传学的一部分，是现代分子生物学的重点研究
方向之一。在这个领域，我们重点关注RNA上发生的化学修饰在细胞及组
织中调控基因表达的表观遗传学变化。RNA修饰作为一种新型的表观遗传
学实体，主要包括5’端帽(又称“端帽”)修饰、3。polyA尾巴及其内部的
核苷修饰。这些修饰不仅影响RNA的结构和功能，还影响RNA与其他生物
分子间的相互作用。比较在不同条件下表观转录组的差异并揭示核苷修饰的
动态变化有助于更深入地理解表观转录组的作用。
本研究利用超高效液相色谱与三重四极杆质谱联用技术，通过对核苷
修饰标准品的质谱检测参数进行优化，建立了能同时检测82种RNA核苷
mRNA上的核苷修饰进行定性定量分析，并进一步通过对HeLa细胞加
以热应激、烷基化毒性应激以及顺铂和紫杉醇两种抗癌药物应激处理，
研究在不同应激条件下HeLa细胞mRNA上的化学修饰含量变化。实验
结果表示，在HeLa细胞mRNA上共检测到l7种核苷修饰，通过内标
定量法获得其绝对含量。经分析，17种核苷修饰含量范围大约在0．07
fmol／ng～2nmol／ng之间，通过未处理和四种应激处理的对比实验发现，
mRNA上的核苷修饰含量均有明显的上调或者下调趋势变化，揭示了暴
露于各种不同类型的环境条件下时，HeLa细胞mRNA上核苷修饰的水
内蒙古大学硕士学位论文
平也会随之发生显著变化。
该检测体系能够有效分析HeLa细胞中RNA修饰含量的动态变化，
有助于深入了解细胞暴露于不同环境下RNA修饰的变化规律，可为后
续研究RNA核苷修饰详细变化机理提供重要的技术和理论支持。
关键词：HeLa细胞；RNA化学修饰；UPLC—MS／MS；MRM
Ⅱ
内蒙古大学硕士学位论文
ANALYSISOFHeLaCELLAPPARENT
QUANTITATIVE
0N
TRANSCRIPTO旭BASED
SPECTRo姬TRY
ABSTRACT
Asaofisoneoftheresearch
partEpigenetics，epigeneticTranscriptomekey
ofmodemmolecularthisfocusonthe
directionsfield，weEpigenetics
biology．In
onRNAthatincellsand
ofchemicalmodifications
changesregulategeneexpression
tissues．Asanewmodificationincludes5’end
typeofEpigeneticsentity,RNAmainly
knownas¨endtailanditsinternalnucleoside
cap(alsocap¨)modification，3’polyA
affectthestructureandfunction
modification．Thesemodificationsnotof
文档评论（0）