人教C版高中生物选择性必修3第3章基因工程第2节第2课时将目的基因导入受体细胞并进行检测与鉴定课件.pptVIP

C.若经B检测确定细胞中无Bt抗虫蛋白的mRNA,可采用核酸分子杂交技术检测细胞中的DNA,若能检测到抗虫基因,则可能是抗虫基因反向插入载体DNA分子中或抗虫基因不能正常转录D.若经C检测确定细胞中无抗虫基因,则可能只是载体DNA分子导入受体细胞答案B解析提取细胞中的蛋白质,采用抗原—抗体分子杂交技术进行检测,若能检测到无Bt抗虫蛋白,说明抗虫基因不表达,从而导致无抗虫性,A项正确;若经A检测确定细胞中无Bt抗虫蛋白,可采用核酸分子杂交技术检测细胞中的RNA,若能检测到Bt抗虫蛋白的mRNA,则可能是抗虫基因能转录,但不能正常翻译出蛋白质,B项错误;若经B检测确定细胞中无Bt抗虫蛋白的mRNA,可采用核酸分子杂交技术检测细胞中的DNA,若能检测到抗虫基因,则可能是抗虫基因反向插入载体DNA分子中,导致其不能正常转录,从而不能合成Bt抗虫蛋白,C项正确;若经C检测确定细胞中无抗虫基因,则可能只是载体DNA分子导入受体细胞,从而不能合成Bt抗虫蛋白,D项正确。2.为使玉米获得抗除草剂性状,科研人员进行了相关操作(如下图所示)。含有内含子的报告基因不能在原核生物中正确表达,其正确表达产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌,会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。下列叙述错误的是()A.T-DNA可将基因G转移并整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上B.利用物质K和抗生素进行筛选1,可获得农杆菌的蓝色菌落C.利用物质K和除草剂进行筛选2,更易于获得抗除草剂的转基因植株D.愈伤组织重新分化为芽、根等器官的过程中,需要添加植物激素答案B解析农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞染色体的DNA上,根据农杆菌的这一特点,将目的基因(基因G)插入Ti质粒的T-DNA上,通过农杆菌的转化作用,就可以把目的基因(基因G)整合到愈伤组织细胞的染色体DNA上,A项正确;农杆菌属于原核生物,含有内含子的报告基因不能在原核生物中正确表达,故利用物质K和抗生素进行筛选1不会出现农杆菌的蓝色菌落,B项错误;报告基因正确表达的产物能催化无色物质K呈现蓝色,而愈伤组织表面残留的农杆菌会导致未转化的愈伤组织能在含除草剂的培养基中生长,因此利用物质K和除草剂进行筛选2,更易于获得抗除草剂的转基因植株,C项正确;愈伤组织重新分化为芽、根等器官的过程中,需要添加植物激素,如生长素和细胞分裂素,D项正确。第3章第2节第2课时将目的基因导入受体细胞并进行检测与鉴定学习目标1.基于实例分析,掌握将目的基因导入受体细胞的方法以及目的基因检测与鉴定的原理。2.结合聚合酶链式反应(PCR)扩增DNA片段并完成电泳鉴定实验,掌握实验原理和操作。基础落实·必备知识全过关重难探究·能力素养全提升目录索引基础落实·必备知识全过关知识点一将目的基因导入受体细胞1.导入植物细胞(1)农杆菌转化法利用农杆菌细胞中Ti质粒上的T-DNA(可转移DNA)___________________的特点,将目的基因插入______________中,通过农杆菌的转化作用,可以使目的基因进入植物细胞。双子叶植物或裸子植物细胞?能够转移并整合到被侵染细胞的染色体DNA上Ti质粒的T-DNA(2)花粉管通道法①用微量注射器将含目的基因的DNA溶液子房中。?②在植物受粉后的一段时间内,剪去柱头,将滴加在花柱切面上,使目的基因借助花粉管通道进入胚囊。?直接注入DNA溶液2.导入动物细胞(受精卵)技术。?表现全能性相对容易3.导入微生物细胞用处理细胞,使受体细胞处于一种的生理状态,再将重组的基因表达载体导入其中。大肠杆菌应用广泛感受态细胞?显微注射Ca2+能吸收周围环境中DNA分子知识点二目的基因的检测与鉴定1.分子水平的检测(1)通过等技术检测受体细胞的染色体DNA上是否插入了目的基因或检测目的基因是否转录出了。?(2)用相应抗体进行,检测目的基因是否翻译成目的蛋白等。?2.个体生物学水平的鉴定:抗虫、抗病接种实验等。PCRmRNA抗原—抗体杂交知识点三DNA片段的扩增及电泳鉴定1.实验原理(1)DNA片段的扩增PCR利用了DNA的原理,通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合。?(2)DNA片段的电泳鉴定①DNA分子具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下,这些带电分子会向