实验6--Feulgen染色观察有丝分裂.pptVIP

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实验六

DNA的细胞化学----Feulgen反应1、掌握Feulgen染色的原理、方法及操作步骤;2、观察并掌握有丝分裂各分裂时相的特点。DNA经温稀酸水解,其上的嘌呤碱和脱氧核酸之间的键打开,使脱氧核糖的一端形成游离的醛基,这些醛基在原位与Schiff试剂中的无色品红反应,形成紫红色的化合物,因此Feulgen反应中,显示紫红色的细胞部位,即标志有DNA的存在。Feulgen反应现仍广泛用于DNA的定性定位和定量的显微测定技术上。1、取生长状态良好,约0.5-1cm长的根尖于固定液中固定数小时,转入70%酒精中保存(已做);2、将上述材料转入1mol/LHCl溶液(青霉素瓶)中,在60℃恒浴条件下解离8-10min.注:每4个人的根尖样品放在同一个青霉素瓶中。3、蒸馏水冲洗后,取出一半样品放入染色缸(另一半样品留在青霉素瓶,做实验8---染色体标本制备)。加入Schiff试剂,避光染色约30min后,直到根尖染上红色,然后倒掉染料,加入蒸馏水;4、将染色后的根尖,放在载玻片上,切去未着色部分,用镊子捣碎、加一滴蒸馏水,盖上盖玻片,用大拇指压一下使根尖细胞分散开;5、用吸水纸吸去盖玻片周围多余的水;6、显微镜观察。绘图示洋葱根尖细胞DNA的分布部位。结合实验结果,试述有丝分裂的前、中、后、末四个时期的典型特征。**实验目的:实验原理:实验材料:洋葱根尖实验步骤:实验结果:思考题:

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