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实验十八生物倒光学显微镜实验

【实验目的】

①学习和了解普通光学显微镜的原理和结构；

②学习掌握光学显微镜的操作，观察标尺和溶液中μm量级的聚苯乙烯小球，并利用

软件采集图像作处理。

③利用磁镊系统观察记录并分析DNA长度与磁力大小的关系，

【实验仪器】

光学倒置显微镜，载玻片，标尺，修饰有DNA分子的样品槽，三维手动微操纵仪，

磁铁

【实验原理】

1．显微镜的成像原理

显微镜和放大镜起着同样的作用，就是把近处的微小体成一放大的像，以供人眼观

察。体位于镜前方，离开镜的距离大于镜的焦距，但小于两倍镜焦距。所以，

它经镜以后，必然形成一个倒立的放大的实像AB。AB再经目镜放大为虚像AB后

供眼睛观察。目镜的作用与放大镜一样。所不同的只是眼睛通过目镜所看到的不是体本

身，而是体被镜所成的已经放大了一次的像。

图1.显微镜成像原理。

【实验装】

光学显微镜结构

普通光学显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分。

1．机械部分

（1）镜座：是显微镜的底座，用以支持整个镜体。

（2）镜柱：是镜座上面直立的部分，用以连接镜座和镜臂。

（3）镜臂：一端连于镜柱，一端连于镜筒，是取放显微镜时手握部位。

（4）镜筒：连在镜臂的前上方，镜筒上端装有目镜，下端装有镜转换器。

（5）镜转换器(旋转器)：接于棱镜壳的下方，可自由转动，盘上有3－4个圆孔，

是安装镜部位，转动转换器，可以调换不同倍数的镜，当听到碰叩声时，方可进行观

察，此时镜光轴恰好对准通光孔中心，光路接通。

（6）镜台(载台)：在镜筒下方，形状有方、圆两种，用以放置玻片标本，中央有一

通光孔，我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推进器(推片器)，推进器左侧有弹簧夹，

用以夹持玻片标本，镜台下有推进器调节轮，可使玻片标本作左右、前后方向的移动。

（7）调节器：是装在镜柱上的大小两种螺旋，调节时使镜台作上下方向的移动。

①粗调节器(粗螺旋)：大螺旋称粗调节器，移动时可使镜台作快速和较大幅度的升

降，所以能迅速调节镜和标本之间的距离使象呈现于视野中，通常在使用低倍镜时，

先用粗调节器迅速找到象。

②细调节器(细螺旋)：小螺旋称细调节器，移动时可使镜台缓慢地升降，多在运用

高倍镜时使用，从而得到更清晰的象，并借以观察标本的不同层次和不同深度的结构。

2．照明部分

装在镜台下方，包括反光镜,集光器。

（1）反光镜：装在镜座上面，可向任意方向转动，它有平、凹两面，其作用是将光源

光线反射到聚光器上，再经通光孔照明标本，凹面镜聚光作用强，适于光线较弱的时候使

用，平面镜聚光作用弱，适于光线较强时使用。

（2）集光器(聚光器)位于镜台下方的集光器架上，由聚光镜和光圈组成，其作用是把

光线集中到所要观察的标本上。

①聚光镜：由一片或数片透镜组成，起汇聚光线的作用，加强对标本的照明，并使

光线射入镜内，镜柱旁有一调节螺旋，转动它可升降聚光器，以调节视野中光亮度的强

弱。

②光圈(虹彩光圈)：在聚光镜下方，由十几张金属薄片组成，其外侧出一柄，推

动它可调节其开孔的大小，以调节光量。

3．光学部分

（1）目镜：装在镜筒的上端，通常备有2－3个，上面刻有5×、10×或15×符号以

表示其放大倍数，一般装的是10×的目镜。

（2）镜：装在镜筒下端的旋转器上，一般有3－4个镜，其中最短的刻有“10×”

符号的为低倍镜，较长的刻有“40×”符号的为高倍镜，最长的刻有“100×”符号的为油

镜，此外，在高倍镜和油镜上还常加有一圈不同颜色的线，以示区别。

显微镜的放大倍数是镜的放大倍数与目镜的放大倍数的乘积，如镜为10×，目镜

为10×，其放大倍数就为10×10=100。

磁镊装

整个装建立在一倒置显微镜（Nikon-TE2000U）上。样品池由两片载玻片夹

住一片侧面抛光的盖玻片并用玻璃胶密封构成。