急性痛风性关节炎动物模型研究进展.ppt

*****急性痛风性关节炎动物模型研究进展随着本病发病率逐年升高，其发病机制和防治途径日益成为研究热点。而动物模型的成功构建是研究疾病发病机制和防治途径的必要手段之一。由于大多数动物具有尿酸分解酶，其可将尿酸分解为尿囊素，MSU晶体在形成之前便可以尿囊素的形式随尿液及时排出体外。因此，一般情况下不会发生高尿酸血症和AGA。但禽类与灵长类的动物体内缺乏尿酸分解酶，其尿酸的代谢过程与人类较为接近，若加上长期高嘌呤饮食，即可引起高尿酸血症及AGA的发生。目前，常用于AGA的造模动物主要有啮齿类、禽类和灵长类动物。啮齿类动物多选用大鼠与家兔；禽类动物常选择鸡作为AGA模型动物；灵长类动物主要选用猴，但由于来源较少及成本昂贵等原因，近年来尚无文献报道。大鼠模型的构建目前，构建AGA大鼠模型的主流方法仍沿用20世纪80年代的Coderre法，即通过大鼠踝关节腔注入0.2mLMSU溶液以诱导AGA。但由于此方法所致AGA与人体AGA的发病机制不相符，故近年来许多学者致力于探索出更好的造模方法。大鼠模型的构建的改进方法改进原理：由于AGA的发生与高尿酸血症密切相关，故有学者提出，应同时建立高尿酸血症和AGA模型，才更接近人类AGA的发病机制。改进方法1.采用Coderre法结合次黄嘌呤，以及Coderre法结合氧嗪酸两种方法造模，并对其进行比较。在检测血尿酸并对大鼠关节滑膜及其步态进行观察后发现，通过次黄嘌呤结合Coderre法构建的AGA大鼠模型更接近人体尿酸代谢紊乱诱发AGA的发病机制。改进方法的弊端腹腔注射高嘌呤成分、尿酸或尿酸酶抑制剂结合Coderre等方法制备的伴高尿酸血症性急性痛风性关节炎动物模型，虽然易于操作，但不能形成持久的模型，且此方法造模与人类痛风病形成的原因相差较大。改进方法2.将次黄嘌呤结合冰敷法构建大鼠AGA模型,通过比较正常组、冰敷组、次黄嘌呤灌胃组和次黄嘌呤灌胃加冰敷组大鼠的关节肿胀程度和步态对动物模型进行判断。在冰敷3d后次黄嘌呤灌胃加冰敷组大鼠膝关节发现大鼠膝关节明显肿胀，并出现轻度跛行，说明该方法可模拟人体因低温条件及高嘌呤饮食结构所致AGA的发病机制。改进方法的弊端灌胃或饲喂造模剂结合冷水浴(敷)方法制备的伴高尿酸血症性急性痛风性关节炎动物模型，尿酸变化大，与人类的痛风性关节炎发生有一定的的相似之处，但动物在寒冷环境中出现明显身体不适，易冻伤死亡，影响了造模成功率，操作繁琐且不可长期持续，有待进一步研究。改进方法3.改良了大鼠造模的进针方法。将进针点定于大鼠右下肢后侧踝关节与胫腓骨间的关节腔，并使踝关节屈曲90°，充分暴露踝关节与胫腓骨的间隙后以45°进针，注射2mLMSU溶液。结果表明，与常规进针方法（即进针点为右后肢足内踝后缘，针向胫跗关节腔）相比，改良后的进针方法具有造模成功率高、稳定性强、创伤性小的优点。改进方法4.因大鼠品种的不同，其对MSU溶液的反应性也存在差异，故可对造模的效果造成不同程度的影响。通过观察不同品系大鼠注射MSU溶液后的炎症反应程度，分别在SD大鼠与Wistar大鼠踝关节外侧后方注入20mg/mL的MSU溶液造模，在造模后9h和12h后分别观察大鼠踝关节的周径及关节液中IL-1β和TNF-α的表达水平。结果显示，与Wistar大鼠比较，SD大鼠对MSU更敏感，更适用于MSU诱导AGA模型的建立。2.家兔模型的构建家兔一般采取McCarty造模方法构建AGA模型，即兔耳缘静脉注射麻醉，然后注射10mgMSU溶液至兔膝关节腔内，诱导致AGA模型。近几年对此造模方法进行改良的研究较为少见。有学者按照McCartyDJ经典的造模方法，选取兔膝关节一侧为进针点，关节腔注射0.4mL50mg/mL的MSU溶液及0.1mL多粘菌素，并对膝关节做屈伸运动5min，结果证明此造模方法具有成功率较高，创伤性较小的优势。3.禽类动物模型的构建1.采用经典的McCarty方法造模，公鸡单侧膝关节局部注射2%MSU溶液0.5ml/kg，每3d注射1次，连续注射4次，并于注射前，注射后5、24、48h后观察其关节形态学改变，采用分级评分标准对模型进行评分，并对进行组织学检测，结果证实造模的公鸡膝关节的软骨及滑膜组织均有明显改变。2.高嘌呤饮食饲喂法也常用于禽类的痛风造模，其通过在产蛋日龄前喂投喂高核蛋白及高钙饲料，同