体外培养细胞的主要设备和实验用品.ppt

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基本设备

灭菌设备

无菌操作设备

细胞培养设备

细胞学鉴定设备

细胞实验室的基本设备配置

冰箱

天平

酸度计

恒温水浴锅

磁力搅拌器

液氮罐

纯水设备

1.基本设备

高温电子灭菌炉

蒸汽式压力灭菌锅

过滤灭菌装置

喷雾消毒器

紫外灯

2.灭菌设备

0.45μm\0.22μm

3.无菌操作设备

超净工作台原理是在在特定的空间内,室内空气经预过滤器初滤,由小型离心风机压入静压箱,再经空气高效过滤器二级过滤,从空气高效过滤器出风面吹出的洁净气流具有一定的和均匀的断面风速,可以排除工作区原来的空气,将尘埃颗粒和生物颗粒带走,以形成无菌的高洁净的工作环境。

4.细胞培养设备

CO2培养箱

离心机

单击添加大标题

温度:37℃±0.5℃

CO2浓度:5%

相对湿度:100%

定期清洗、消毒

倒置显微镜

荧光显微镜

酶标检测仪

流式细胞仪

LOGO

5.细胞学鉴定设备

细胞培养实验用品

培养瓶(25、75cm2)

培养板(96、48、24、12、6孔)

培养皿(各种直径规格)

离心管(15、50ml)

移液管、吸管

冻存管、EP管

试剂瓶等。

常见种类:MEM,DMEM,RPMI1640

4℃保存,避免光照;用前放在37℃温热。

细胞培养常用的培养液

细胞培养液

主要成分:水、无机盐、氨基酸、维生素、葡萄糖

其他成分:酚红、HEPES、丙酮酸钠

酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为橙色,酸性时为黄色,碱性时为红色。

HEPES是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。

丙酮酸钠的主要作用是抗氧化,清除过氧化氢等自由基。

培养基选择:按提供细胞来源的要求准备。

什么情况下选择无酚红培养基:

酚红影响到实验结果

流式细胞仪检测细胞样品

血清

血清分类

1.特级胎牛血清(最高级别的)

(1)Hyclone北美特级胎牛血清(SH30070.03)(2)Gibco北美特级胎牛血清(16000-044)

2.优等级胎牛血清

(1)Hyclone加拿大优等胎牛血清(SH30396)

(2)Hyclone澳大利亚优等胎牛血清(SH30084)

(3)Gibco澳大利亚胎牛血清(10099-141)

3、普通进口胎牛血清

如Hyclone南美胎牛血清(SV30087)

4、国产的各种系列胎牛血清

国产的胎牛血清,国内没有严格意义的胎牛血清,胎牛血清本身是需要穿刺取血的,而国内都是剖腹产出胎牛,8小时左右取血,然后,进行过滤分装。

5、其他血清

新生牛血清,小牛血清,一般国产的。

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