第十二章-化学酶工程.pptVIP

三、分子印迹聚合物的制备**酶工程第12章化学酶工程1、制备方法传统方法：选定模板分子和功能单体，使他们之间相互作用（共价或非共价作用）；使用交联剂，在模板分子周围发生聚合作用；干燥后研磨、破碎、过筛得到一定颗粒大小的印迹聚合物；除去印迹聚合物中的模板分子。三、分子印迹聚合物的制备**酶工程第12章化学酶工程1、制备方法改进方法：扩散聚合：模板分子、功能单体和交联剂一起溶于有机溶剂，然后一起移入水中，加入交联引发剂，制备颗粒均一的印迹聚合物；悬浮聚合：用四氟化碳液体作为悬浮介质，代替传统的有机溶剂-水悬浮介质，消除非共价印迹中存在的不稳定的预组织体。表面印迹：对无机或有机离子表面进行修饰，产生分子印迹空腔或印迹结合部位。四、影响分子印迹聚合物选择性的因素**酶工程第12章化学酶工程理想分子印迹聚合物应具有的性质（1）具备刚柔相间的结构（2）具有较好的机械稳定性和热稳定性（3）对底物具有一定的选择性四、影响分子印迹聚合物选择性的因素**酶工程第12章化学酶工程影响分子印迹聚合物选择性的因素（1）模板分子的种类：决定功能单体上基团的定向（2）模板分子与功能单体的相互作用：需要排除影响两者发生印迹反应的因素，如抑制剂、静电斥力、空间位阻等（3）聚合反应的条件溶剂：溶剂的极性和介电常数影响功能单体和模板分子两者之间的选择性和亲和力，非共价作用一般在疏水性有机溶剂中进行，共价作用一般在极性较强的溶液中进行温度：低温利于形成有序、稳定、选择性高的聚合物交联剂：类型和用量聚合物牢固程度、空穴部位的形状和基团取向，进而影响分子印迹聚合物的选择性五、分子印迹酶**酶工程第12章化学酶工程分子印迹酶的制备原理通过分子印迹技术产生类似于酶活性部位的空腔，对底物产生有效的结合作用，并在结合部位的空腔内诱导产生催化基团与底物定向排列。分子印迹酶的制备**酶工程第12章化学酶工程1、印迹底物、底物类似物或产物例如：二肽合成酶的分子印迹模板分子（产物）：L-天冬氨酰-L-苯丙氨酸甲酯功能单体：甲基丙烯酸甲酯交联剂：二亚乙基丙烯酸甲酯分子印迹酶的制备**酶工程第12章化学酶工程2、印迹过渡态类似物例如：对硝基苯甲酸酯水解酶的分子印迹模板分子（过渡态类似物）：对硝基苯甲基磷酸酯功能单体：4（5）-乙烯咪唑交联剂：1,4-二溴丁烷催化反应：对硝基苯乙酸酯分子印迹酶的制备**酶工程第12章化学酶工程3、引入催化功能基团在结合部位的适当位置引入催化基团例如：水解酶的分子印迹含咪唑基的功能单体与过渡态类似物结合形成稳定复合物，作为模板分子，再与功能单体结合，产生分子印迹聚合物具有很强的酯水解活性六、生物印迹酶**酶工程第12章化学酶工程生物印迹酶的概念以天然生物材料（蛋白质、糖类等）为骨架，对一些酶的配体，如底物、抑制剂、过渡态类似物等进行分子印迹，制备具有特异性识别空腔的分子印迹聚合物的过程。六、生物印迹酶**酶工程第12章化学酶工程生物印迹酶的制备过程蛋白变性，使其具有可塑性加入模板分子与变性蛋白混合，使相互作用交联，固定蛋白与模板分子的结合构象除去模板分子本章作业**酶工程第12章化学酶工程1、酶化学修饰提高酶稳定性的原因是什么？2、为什么环糊精可以作为模拟酶的模型？2、简述分子印迹的基本过程。5、延长酶的半衰期**酶工程第12章化学酶工程延长半衰期的机理增强了抗蛋白水解酶、抗抑制剂和抗失活因子的能力热稳定性提高6、改变动力学性质**酶工程第12章化学酶工程Km变大有些酶经化学修饰后，Km变大，这可能是由于交联与酶上的大分子修饰剂增大了空间位阻，影响了酶与底物的结合。7、提高组织选择性**酶工程第12章化学酶工程提高组织选择性有些酶经化学修饰后，对组织或器官的分布能力有所改变，能被靶器官选择性的吸收。8、提高酶活力**酶工程第12章化学酶工程提高酶活力有些酶经适当的化学修饰后，酶与底物分子更容易结合，使酶分子周围的底物浓度提高，因而提高酶催化活力。第二节模拟酶模拟酶及其性质**酶工程第12章化学酶工程模拟酶的概念是一类利用有机化学方法合成的，比天然酶简单的非蛋白分子，又称人工合成酶。具有两个特殊部位：底物结合部位和催化部位。模拟酶的性质具有疏水键合区和底物发生相互作用；能与底物形成静电或氢键等相互作用，并以适当的方式相互键合；模拟酶的结构对底物键合的方向和立体化学具有