新型冠状病毒核酸检测7种振荡混匀方法效果评价.docxVIP

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2024-04-17 发布于江苏
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新型冠状病毒核酸检测7种振荡混匀方法效果评价.docx

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·680·检验医学2023年7月第38卷第7期LaboratoryMedicine，July2023，Vol.38，No.7

文章编号：1673-8640（2023）07-0680-06中图分类号：R446.1文献标志码：ADOI：10.3969/j.issn.1673-8640.2023.07.012

新型冠状病毒核酸检测7种振荡混匀方法效果评价

杜晶辉1贺鑫1刘晶1刘瑞岩1鲍志军1王俊1赵岩1雷曜荣1刘旻2刘旭1

（1.国家中医针灸临床医学研究中心天津中医药大学第一附属医院检验科，天津300193；

2.国家中医针灸临床医学研究中心天津中医药大学第一附属医院感染疾病科，天津300193）

摘要：目的对新型冠状病毒（SARS-CoV-2）核酸检测7种振荡混匀方法进行比较，确定有效方法的最优参数。方法分2个阶段进行研究：第1阶段，采用小样本（每种方法30例），从形态学、流式细胞术、实时荧光聚合酶链反应（PCR）3个层面评价7种振荡方法的有效性，并确定最优时间参数；第2阶段，采用大样本（2150例），验证最优参数下多管涡旋和超声振荡的效果。结果形态学和流式细胞术分析结果显示，除超声振荡外，其他6种振荡混匀方法均会导致保存液中上皮细胞明显增多（r0.05）。实时荧光PCR结果显示，颠倒和回旋振荡处理后，核酸扩增未见内参循环阈值（Ct）明显下降（r0.05）；吹打6次和往复振荡5min处理后，核酸扩增未见内参Ct值下降；单管/多管涡旋和超声振荡处理后，核酸扩增内参Ct值显著下降（r0.0001）。大样本量实时荧光PCR结果显示，多管涡旋振荡2min较超声振荡5min效果更优（r0.0001）。结论SARS-CoV-2核酸检测采用2min涡旋振荡混匀的方法进行前处理可提高检测效率。

关键词：新型冠状病毒；实时荧光聚合酶链反应；振荡混匀；样本前处理；假阴性

Evaluationof7oscillatingmixingmethodsforSARS-CoV-2nucleicaciddeterminationDUJinghui1，HEXin1，LIUJing1，LIURuiyan1，BAOZhijun1，WANGJun1，ZHAOYan1，LEIYaorong1，LIUMin2，LIUXu1.（1.DepartmentofClinicalLaboratory，theNationalClinicalResearchCenterforChineseMedicineAcupunctureandMoxibustion，theFirstHospitalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine，Tianjin300193，China；2.DepartmentofInfectiousDiseases，theNationalClinicalResearchCenterforChineseMedicineAcupunctureandMoxibustion，theFirstHospitalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine，Tianjin300193，China）

Abstract：ObjectiveToevaluatetheeffectof7oscillatingmixingmethodsforsevereacuterespiratorysyndromecoronavirus2（SARS-CoV-2）nucleicaciddeterminationanddeterminetheoptimalparametersofeffectivemethod.MethodsInthe?rststage，30samples（smallsample）ofeachoscillatingmixingmethodwereusedto