3.1重组DNA技术的基本工具课件高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptx

第三章基因工程第1节重组DNA技术的基本工具导入扩增

从社会中来转基因番木瓜（左）与非转基因番木瓜（右）番木瓜容易受番木瓜环斑病毒的侵袭。当番木瓜被这种病毒感染后，产量会大大下降。科学家通过精心设计，用“分子工具”培育出了转基因番木瓜，它可以抵御番木瓜环斑病毒。DNA双螺旋的直径只有2nm,对如此微小的分子进行操作，是一项非常精细的工作，更需要专门的“分子工具”。那么，科学家究竟用到了哪些“分子工具”？这些“分子工具”各具有什么特征呢？

基因工程就是按照人们的愿望（定向），通过转基因等技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品，从技术操作层面看，由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做重组DNA技术。选必三P67操作对象操作水平操作环境操作原理结果优点基因DNA分子水平赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因重组克服远缘杂交不亲和的障碍；定向改造生物的遗传特性。生物体外

抗病毒基因重组DNA分子“切割”“拼接”番木瓜体细胞导入表达为什么一种生物的基因可以在另一种生物细胞内表达？①基因是控制生物性状的独立遗传单位②生物界共用一套遗传密码③遗传信息的传递都遵循中心法则为什么不同生物的DNA分子能拼接起来？①DNA的基本组成单位都是4种脱氧核苷酸②都遵循碱基互补配对原则③DNA分子的空间结构都是规则的双螺旋结构基因工程诞生的理论基础

抗病毒基因重组DNA分子“切割”“拼接”番木瓜体细胞导入表达准确切割DNA分子的“分子手术刀”将DNA片段再连接起来的“分子缝合针”将体外重组好的DNA分子导入受体细胞的“分子运输车”限制性内切核酸酶DNA连接酶载体DNA分子极小，实现这些精确操作需要哪些“分子工具”呢？

一、限制性内切核酸酶—“分子手术刀”1.来源：主要从原核生物中分离纯化来的数千种2.种类：（限制酶不是一种酶，而是一类酶）【P72资料卡】限制酶名字的由来限制酶是如何命名的呢？是用生物属名的头一个字母与种加词的头两个字母，组成了3个(拉丁文)字母的略语，以此来表示这个酶是从哪种生物中分离出来的。例如，一种限制酶是从大肠杆菌（Escherichiacoli）的R型菌株分离来的，就用字母EcoR表示；如果它是从大肠杆菌R型菌株中分离出来的第一种限制酶，则进一步表示成EcoRⅠ。①粘质沙雷氏杆菌(Serratiamarcesens)中分离的第一种限制酶为_______；②流感嗜血杆菌的d菌株(Haemophilusinfluenzaed)中先后分离出3种限制酶，则分别命名为：_______________________________。HindⅠ、HindⅡ、HindⅢSmaⅠ简称：限制酶

5'3'5'3'TAGGTATCCA一、限制性内切核酸酶—“分子手术刀”（1）能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列（特异性），（2）使每一条链中特定部位的磷酸二酯键断开。3.作用：磷酸二酯键作用部位限制酶识别的核苷酸序列由几个核苷酸组成？

限制酶所识别序列的特点是：1.呈现碱基互补对称2.都可以找到一条中心轴线3.中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的，称为回文序列在切割部位，一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。4.限制酶的识别序列大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成；也有少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成。

【反馈练习】1.下面哪项不具有限制酶识别序列的特征（）A．GAATTCB．GGGGCCCCCTTAAGCCCCGGGGC．CTGCAGD．CTAAATCGACGTCGATTTAGD

EcoRⅠ(在G与A之间切割)中轴线黏性末端平末端SamⅠ(在G与C之间切割)产生黏性末端或平末端5.实例：识别特定序列为GAATTC；切割特定部位为G、A之间的磷酸二酯键6.切割结果：EcoRI限制酶和SmaI限制酶识别特定序列为CCCGGG；切割特定部位为C、G之间的磷酸二酯键被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。

例：限制酶EcoRI的识别序列和切点是－G↓AATCC－，补充完整切割过程图：限制酶SmaI