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第55卷第1期海洋与湖沼Vol.55,No.1
2024年1月OCEANOLOGIAETLIMNOLOGIASINICAJan.,2024
漂白粉消毒后对虾养殖源水细菌群落的响应特征研究*
王庚申1,2,3颜懿1,2李彤1,2董鹏生1,2谢建军3
许文军3张德民1,2张化俊1,2①
(1.宁波大学农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室浙江宁波315211;2.宁波大学海洋学院浙江宁波
315211;3.浙江省海洋水产研究所浙江省海水增养殖重点实验室浙江舟山316021)
摘要漂白粉消毒是凡纳滨对虾养殖源水常见的管控措施,可有效控制病原菌传播;然而,消毒
会强烈扰动水体微生物群落,但源水细菌群落对漂白粉消毒的响应特征尚未阐明。在室内条件下,设置高浓度(60mg/L)和低浓度(20mg/L)漂白粉消毒源水,通过高通量测序及荧光定量PCR技术探究消毒后源水细菌群落、病原菌及抗生素抗性基因(ARGs)的动态响应规律。结果显示,消毒后,拟杆菌门(Bacteroidota)丰度上升,高浓度组变形菌门(Proteobacteria)的丰度显著降低;至第3天,两组源水的细菌群落组成趋于一致。此外,漂白粉消毒显著改变了源水的细菌群落结构及共现网络的复杂性。在控制水体病原菌方面,消毒后病原菌的总丰度降低,但种类增加,高浓度漂白粉消毒对病原菌的抑制作用更加显著。漂白粉消毒对ARGs的去除具有选择性,仅对sul1、floR、cfr、tetQ有一定的去除作用,且高、低浓度对ARGs的去除无差异。综上,60mg/L可以作为漂白粉消毒养殖源水的更好浓度选择。研究结果从微生物生态视角评价了不同浓度漂白粉的消毒作用,可为对虾养殖生产中的源水管控提供理论支撑。
关键词漂白粉;养殖源水;细菌群落;病原菌;抗性基因
中图分类号S967.4doi:10.11693/hyhz20230800163
为了防控凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)的传染性疾病,对源水消毒是养殖的关键环节之一。漂白粉是对虾养殖源水消毒中常用的一种卤素类消毒剂,具有价格低、杀菌力强、使用方便等特点。漂白粉是氢氧化钙、氯化钙、次氯酸钙的混合物,溶解在水中时水解成次氯酸离子和氯离子。次氯酸离子的强氧化作用可以杀死细菌,氯离子也表现出一定的杀菌功能(Maetal,2019)。研究表明,大多数病原对次氯酸钙敏感,且杀菌效果与剂量有关(Parketal,2004;Limsuwanetal,2008;Chaetal,2012)。一般认为,对养殖源水消毒可以有效去除病原微生物,但由于消毒机制的非特异性,水体中的有益微生物也会被杀
灭。由于细菌类群生理及群落组成的多样性,水体中不同的微生物类群会对消毒表现出不同的响应或恢复能力(Becerra-Castroetal,2016)。目前,对消毒后养殖源水细菌群落的恢复动态仍知之甚少。
抗生素抗性基因(antibioticresistantgenes,ARGs)可以通过水平转移将移动遗传元件转至病原菌中,使病原菌产生抗生素抗性,威胁公共卫生健康(Joetal,2021)。由于河流汇入及水产养殖活动,ARGs在近海海区环境中普遍存在(Hedbergetal,2018),近海养殖源水是对虾养殖池塘环境中ARGs的主要来源(夏涛涛等,2022),在华南及华东地区的对虾养殖源水中均检测到了多种养殖中常见抗生素的ARGs(Wanget
*浙江省“三农九方”科技协作计划资助项目,2022SNJF70号;宁波市农业重大专项,2021Z105号;象山县科技计划,2021XSX040003号,2022C1001号。王庚申,博士研究生,工程师,E-mail:w
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