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枸杞中枸杞酸的测定液相色谱法

1范围

本文件规定了枸杞中枸杞酸含量的液相色谱法。

本文件适用于枸杞中枸杞酸的测定和确证。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，

注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用本文件；不注日期的引用文件，其最

新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

样品经甲醇溶液提取，超声离心，采用液相色谱仪测定，外标法定量。

5试剂和材料

除另有说明，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1乙腈(CHCN)：色谱纯。

3

5.1.2甲醇(CHOH)：色谱纯。

3

5.2试剂配制

5.2.150%甲醇溶液：准确移取500mL甲醇（5.1.2）至1000mL容量瓶中，用水定容至刻

度。

5.3标准品

5.3.1枸杞酸（CAS号：562043-82-7）：纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标

准品。

5.4标准溶液制备

5.4.1标准储备液（10mg/mL）：准确称取适量的枸杞酸标准物质（5.3.1），用甲醇（5.1.2）

配制成浓度为10mg/mL的标准储备液。标准储备液在-18℃及以下避光保存。

5.4.2标准中间液（1mg/mL）：移取适量混合标准储备液（5.4.1），用甲醇溶液（5.1.2）稀

释成浓度为1mg/mL的标准中间液。

5.4.3标准工作液：移取适量混合标准中间液（5.4.2），用50%甲醇溶液（5.2.1）稀释成浓

度为1.0μg/mL、2.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL、100.0

μg/mL、200.0g/mL的混合标准工作溶液。临用现配。

6仪器和设备

6.1液相色谱仪：带紫外检测器或二极管阵列检测器。

6.2分析天平：感量为0.00001g和0.01g。

6.3高速离心机：15000r/min。

6.4超声波振荡器。

6.50.45m滤膜。

7分析步骤

7.1试样制备

取约200g样品于匀浆机中匀浆。制得样品在-18℃下保存。

7.2试样的提取

称取0.5g（精确至0.01g）试样于50mL离心管中，加入50mL50%甲醇溶液

（5.2.1），超声提取20min，15000r/min离心5min，转移至100mL容量瓶中。再加入40

mL50%甲醇溶液（5.2.1），超声提取并离心，合并两次上清液，用50%甲醇溶液（5.2.1）

定容至刻度并充分混匀。取上清液过0.45m滤膜，滤液待上机测定。

7.3液相色谱参考条件

a)色谱柱：SIL色谱柱（150mm×4.6mm，5μm），或同等性能色谱柱；

b)柱温：35℃；

c)检测波长：235nm；

d)进样量：20μL；

e)流速：1.0mL/min；

f)流动相：水-乙腈（10+90）。

7.4测定

7.4.1标准曲线测定

将枸杞酸标准工作液依次进行色谱分析（标准色谱图见附录A中图A.1）。以标准工作

液浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

7.4.2试样溶液的测定

将试样测定液进行色谱分析，根据试样峰面积从标准曲线中查得相应的枸杞酸浓度。

8分析结果的表述

试样中枸杞酸的含量按式（1）计算。

(CC0)V(1)

X

m

式中：

—试样中枸杞酸的含量，单位为微克每千克（mg/kg）；

由标准曲线得到的试样溶液中枸杞酸的质量浓度，单位为微克每毫升（μg/mL)；

V—样品测定液总体积，单位