实验二十一细菌的芽孢和荚膜染色法.ppt

第191页,共199页，2024年2月25日，星期天第159页,共199页，2024年2月25日，星期天第160页,共199页，2024年2月25日，星期天

五、绘图：绘芽孢染色、荚膜染色的结果；六、预习：放线菌、霉菌、酵母菌的形态观察第161页,共199页，2024年2月25日，星期天第162页,共199页，2024年2月25日，星期天实验二十二放线菌、霉菌、酵母菌的形态观察第163页,共199页，2024年2月25日，星期天一、实验的目的学习和掌握观察放线菌、霉菌形态的基本方法，并观察它们的个体形态特征。第164页,共199页，2024年2月25日，星期天二、实验原理1、放线菌：放线菌是介于细菌与丝状真菌之间而又接近于细菌的一类丝状原核生物，因菌落呈放射状而得名。放线菌的菌落在培养基上着生牢固，不易被接种针挑取，由于孢子的存在，常使菌落表面呈粉末状。它和细菌单染色一样，可用石炭酸复红和吕氏美蓝等染料着色后，在显微镜下观察它们的形态。放线菌是由不同长短的纤细的菌丝所组成的单细胞菌丝体，菌丝内无隔膜，菌丝体分为两部分，即潜入培养基中的营养菌丝（基内菌丝）和有营养菌丝向上生长的气生菌丝，有些气生菌丝分化成各种孢子丝，呈螺旋状、波浪形或分枝状等，着生形式有丛生、互生和轮生三种。孢子的表面光滑或粗糙，圆或椭圆和干形。孢子有各种颜色。这些形态特点都是鉴别放线菌的重要依据。第165页,共199页，2024年2月25日，星期天⑴营养菌丝：又叫初级菌丝体或一级菌丝体，匍匐生长于培养基内，主要生理功能是吸收营养物，故亦称基内菌丝。营养菌丝一般无隔膜，直径0.2—0.8μ，但长度相差很大，短的小于100μ，长的可达600μ以上，有的无色素，有的产生黄、橙、红、紫、兰、绿、褐、黑等不同色素，若是水溶性的色素，还可透入培养基内，将培养基染上相应的颜色，如果是非水溶性（脂溶性）色素，则使菌落呈现相应的颜色，因此，色素是鉴定菌种的重要依据。第166页,共199页，2024年2月25日，星期天⑵气生菌丝：又称二级菌丝体。营养菌丝体发育到一定时期，长出培养基外并伸向空间的菌丝为气生菌丝。⑶孢子丝：当气生菌丝体发育到一定程度，其上分化出可形成孢子的菌丝即孢子丝，又名产孢丝或繁殖丝。放线菌最突出的特性之一是产生大量的、种类繁多的抗生素，根据估计，全世界共发现4000多种抗生素，其中绝大部分是由放线菌产生的。第167页,共199页，2024年2月25日，星期天第168页,共199页，2024年2月25日，星期天2、霉菌：霉菌是一些“丝状真菌”的统称，不是分类学上的名词。凡是在基质上长成毛状、棉絮状或蜘蛛网状的丝状真菌统称霉菌。霉菌形态比细菌、放线菌复杂，个体比较大，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。因此，在观察是要注意菌丝的直径大小，菌丝体有无隔膜，营养菌丝有无假根，无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子是哪一种，孢子是怎样着生的。由于霉菌的菌丝较粗大，而且孢子容易飞散，如将菌体置于水中容易变形，故观察时状不用水浸法制片，而将菌体置于乳酸石炭酸棉兰染液中，使细胞不易干燥，并有杀菌作用。第169页,共199页，2024年2月25日，星期天三、材料1、菌种：5406放线菌、青霉菌、黑曲霉、根霉、酵母菌；2、染料：石炭酸复红、0.1%吕氏美蓝、乳酸石炭酸棉兰；3、器材：载玻片、盖玻片、酒精灯、镊子、接种针、接种铲等。第170页,共199页，2024年2月25日，星期天四、方法及步骤1、放线菌：用接种铲切取5406放线菌一块（带有培养基）→在载玻片上轻压一下，弃去培养基，制成印片→固定（火焰）→石炭酸复红（染色）→水洗→吸干→镜检。第171页,共199页，2024年2月25日，星期天图扦片法第172页,共199页，2024年2月25日，星期天第173页,共199页，2024年2月25日，星期天2、霉菌：在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉兰→用镊子取少许霉菌（三种）于染色液中→挑开菌丝→盖上盖玻片→镜检。第174页,共199页，2024年2月25日，星期天第175页,共199页，2024年2月25日，星期天第176页,共199页，2024年2月25日，星期天第177页,共199页，2024年2月25日，星期天第178页,共199页，2024年2月25日，星期天第179页,共199页，2024年2月25日，星期天第180页,共199页，2024年2月25日，星