基因突变和基因工程.ppt

基因突变基因重组产生新的基因（基因分子结构改变），而产生新的基因型不产生新的基因（基因分子结构不变），但基因重组产生新的基因型区别第29页,共47页，2024年2月25日，星期天基因结构改变基因结构不变，不同基因重新组合。细胞分裂间期由于外界理化因素或自身生理因素引起的碱基对的替换、缺失或增添减数第一次分裂前期的四分体时期的交叉互换；减数第一次分裂后期，非同源染色体上的非等位基因自由组合。外界环境条件的变化和内部因素的相互作用。有性生殖过程中进行减数分裂形成生殖细胞。新基因产生的途径，是生物变异的根本来源,是生物进化的原始材料。是生物变异的重要来源，是形成生物多样性的重要原因，对生物的进化也具有重要的意义突变频率低，但普遍存在有性生殖中非常普遍产生了新基因，出现了新性状。不产生新基因，而是产生重组的基因型，使不同性状重新组合。第30页,共47页，2024年2月25日，星期天四、基因工程（一）概念：又叫做基因拼接技术或DNA重组技术通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。基因重组生物体外定向地改造生物的遗传性状，打破物种界限，能克服远缘杂交不亲和的障碍第31页,共47页，2024年2月25日，星期天1、基因“剪刀”----限制性内切酶（限制酶）（1）功能：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，切割特定DNA切点，具特异性，并裂解磷酸二酯键。EcoRⅠGAATTCCTTAAG5′3′5′3′5′GCTTAAAATTCG3′3′5′粘性末端（二）、基因工程操作工具SmaⅠCCCGGGGGGCCC5′3′3′5′5′CCCGGGGGGCCC3′3′5′平口末端第32页,共47页，2024年2月25日，星期天（2）结果：产生两个带有相同黏性末端或平口末端的DNA片段（3）要想从DNA上切下某个基因,应切2个切口,产生4个黏性末端（4）限制酶不是一种酶，而是一类酶，目前已发现的限制酶有4000多种。第33页,共47页，2024年2月25日，星期天2、基因的“针线”——DNA连接酶连接酶的作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。连接的部位：相邻的两个脱氧核苷酸的切口，即：生成磷酸二酯键DNA连接酶的作用过程：第34页,共47页，2024年2月25日，星期天基因的针线：DNA连接酶

GAATTCCTTAAGGAATTCCTTAAGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCGGCTTAAAATTCG用同种限制酶切割第35页,共47页，2024年2月25日，星期天小结：与DNA有关酶的作用DNA酶：即DNA水解酶，可以将DNA水解成脱氧核苷酸。DNA聚合酶：在DNA复制的过程中，连接单个游离的脱氧核苷酸到DNA片段上，需要模板，引物。DNA连接酶：连接两个DNA片段，形成磷酸二酯键，不需要模板。解旋酶：在DNA复制时，破坏氢键，使DNA双链打开。限制性核酸内切酶：破坏脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。第36页,共47页，2024年2月25日，星期天3、基因的运输工具——运载体(1)化学本质：DNA标记基因：运载体上且用于鉴定筛选的基因。标记基因一般都是抗生素抗性基因，只要在相应的抗生素培养基上培养筛选就可以，能活下来的就是目的基因已经进入受体细胞。(2)作为运载体必须具备哪些条件？1）能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。2）具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。3）具有某些标记基因，便于进行筛选。第37页,共47页，2024年2月25日，星期天第一步：（三）、基因工程基本步骤：第二步：获取目的基因目的基因与运载体结合（体外进行）方法：1、直接分离2、人工合成注意：要用同一种限制酶切取目的基因和运载体，并用DNA连接酶连接。作用：将目的基因送入受体细胞第38页,共47页，2024年2月25日，星期天第三步：第四步:将目的基因导入受体细胞目的基因的检测和表达1、常用微生物作受体细胞的原因：微生物增殖快、代谢快、目的产物多1、检测：通过检测标记基因的有无，来判断目的基因是否导入。2、表达：通过特定性状或蛋白质的产生与否来确定目