(2.2)--[3].chapter3酶工程酶工程酶工程.pptVIP

抗体酶合成的理论基础1948年，Pauling提出的过渡态理论。过渡态理论认为,酶之所以能够催化加速化学反应,在于它能够和底物结合形成过渡态中间体,从而降低了反应的活化能,使反应加速进行。*1、在酶的催化反应中，与酶的活性中心形成复合物的实际上是过渡态的底物。2、能与过渡态结合的物质也具有酶的性质;抗体一旦能与过渡态相结合，它就具有酶的性质。设计原理：设计和制备稳定的过渡态类似物作为半抗原诱导产生抗体，这样产生的抗体就能识别反应过程的真正过渡态，该抗体具有酶催化反应的基本特征，成为一种具有酶活性的抗体也即抗体酶。*1.4.1半抗原诱导法半抗原：能与对应抗体结合出现抗原-抗体反应、又不能单独激发人或动物体产生抗体的抗原。它只有反应原性，不具免疫原性（抗原性），又称不完全抗原。载体蛋白半抗原抗体酶抗体过渡态类似物制备半抗原制备单克隆抗体免疫动物分离筛选抗体酶反应过渡态底物*1.4.1半抗原诱导法以预先的过渡态底物类似物作半抗原，与载体蛋白偶联制备抗原，然后免疫动物，再经过单克隆抗体制备筛选得到的抗体酶。半抗原诱导法*半抗原：能与对应抗体结合出现抗原-抗体反应、又不能单独激发人或动物体产生抗体的抗原。它只有反应原性，不具免疫原性，又称不完全抗原。木瓜蛋白酶：木瓜生长期8个月，木瓜细胞培养约1个月通过严格的培养条件控制，减少植株病虫害和污染15-100h**

EnzymeEngineering第三章动植物细胞培养产酶动植物细胞培养产酶是通过特定技术获得优良的动物和植物细胞，然后在人工控制条件的反应器中进行细胞培养，以获得所需产物的技术过程。第三章动植物细胞培养产酶*内容要点第一节动植物细胞中酶生物合成的调节第二节植物细胞培养产酶第三节动物细胞培养产酶掌握动植物细胞合成酶特有的调节方式；熟悉植物细胞培养产酶及动物细胞培养产酶的特性及生产工艺。重点：端粒酶，抗体酶，动植物细胞培养产酶流程；难点：抗体酶;半抗原*学习要求*第一节动植物细胞中酶生物合成的调节第一节动植物细胞中酶生物合成的调节概述：共性：有关微生物细胞中酶合成的调节理论也基本适用于动植物细胞：酶合成的诱导、酶合成的阻遏；*个性：动植物细胞具有比微生物更多的调节方式如激素、神经调节；1、细胞分化改变酶的生物合成2、基因扩增加速酶的合成3、增强子促进酶的生物合成4、抗原诱导抗体酶的生物合成第一节动植物细胞中酶生物合成的调节*1细胞分化改变酶的生物合成由于真核生物基因表达的时空差异，不同分化类型的细胞中基因表达不同，酶的合成和表达不同。细胞分化可以改变酶的生物合成。*如端粒酶的合成。随着细胞分化，端粒酶的生物合成发生了改变，分化程度越高，端粒酶活性越低。端粒是真核生物染色体的末端结构，由富含GT的DNA序列不断重复而成。如人的端粒重复单位为TTAGGG。1.1端粒的结构与功能*每次细胞分裂（DNA复制）每次染色体进行复制的时候，末端的DNA总是会发生丢失，即留下一个末端空缺。1.1端粒的结构与功能*随着细胞不断分裂，端粒的长度将越来越短，当达到一个临界长度时，染色体会失去稳定性而被降解。1.1端粒的结构与功能*端粒的功能：端粒可以保护真核生物染色体免遭破坏，保护染色体的完整性。1.1端粒的结构与功能*随着细胞不断地进行分裂，端粒的长度将越来越短，当达到一个临界长度时，染色体会被降解，细胞不再分裂而凋亡，端粒的长度决定了细胞的寿命，因此可根据端粒重复序列的长度来推测细胞可以进行分裂的次数。1.1端粒的结构与功能*10000对7500对4800对端粒——“生命时钟”*端粒的功能：端粒可以保护真核生物染色体免遭破坏，保护染色体的完整性。1.1端粒的结构与功能*端粒酶是催化端粒合成和延长的酶，为一种核糖核蛋白，包含蛋白质和RNA两种基本成分。1.2端粒酶的结构与功能*端粒酶是蛋白类酶还是核酸类酶？人类端粒酶RNAhumantelomeraseRNAcomponent，hTERC人类端粒酶逆转录酶humantelomerasereversetranscriptase，hTERT*端粒酶是核蛋白逆转录酶，以自身RNA为模板，合成端粒DNA，将端粒DNA加至真核细胞染色体末端，为细胞持续分裂提供遗传基础。1.2端粒酶的结构与功能*端粒酶具有逆转录酶活性，属于蛋白类酶。端粒酶是蛋白类酶还是核酸类酶？*端粒酶可以通过结合、延伸、移位三个步骤催化端粒的合