iTRAQ定量蛋白质组学.pptVIP

iTRAQ定量蛋白质组学;主要内容;iTRAQ技术简介;*;*;※首选2-3次生物重复，最好3次或以上

?组内样品个体差异大的材料需要更多的生物重复

?生物学重复样品较多时，可以适当混合以减少样品数目

?无任何重复，可以结合其他技术进行验证;iTRAQ试剂标记原理;图1iTRAQ技术原理图;iTRAQ技术优势;iTRAQ实验流程;iTRAQ实验结果例如;案例1：人脑脊液〔客户文章未发表，资料仅供内部参考〕;结果;;数据分析;数据分析;数据分析;数据分析;案例2。蜂王浆提取物对肿瘤细胞的影响;数据分析;客户关注的信号通路〔pathway〕;;; 差异表达蛋白相互作用网络分析

;总结;高阶〔客制化〕信息分析;iTRAQ详细实验步骤—ABI试剂盒;iTRAQ详细实验步骤;iTRAQ详细实验步骤;iTRAQ详细实验步骤;iTRAQ详细实验步骤;iTRAQ详细实验步骤;B%从5分钟5%到40分钟上升至25%

Time(min)B%

0 0

5 5

4025

4580

5080

510

60stop

根据峰型和时间共收取20个梯度,真空离心浓缩后，用50μLRPLCA相[5%ACN,0.1%甲酸(TEDIA,Fairfield,USA)]溶解，进行第二维分析。

;iTRAQ详细实验步骤;Time(min)B%

55%

9035%

9580%

10080%

1055%

120stop

质谱鉴定：MS扫描范围400-1800

MS/MS扫描范围100-2000

IDA采集模式

一个图谱选择四个最强的母离子进行串级扫描。

;iTRAQ详细实验步骤;THANKS!