TCACM 012-2016金钱白花蛇快速PCR鉴定.pdf

目摇摇次

前言…………………………玉

1摇范围………………………1

2摇规范性引用文件…………………………1

3摇术语和定义………………1

4摇方案………………………2

5摇仪器设备…………………2

6摇试剂和溶液配制…………………………2

7检验程序……………………3

8摇结果判定…………………4

9摇结果报告…………………4

10摇质量保证…………………4

11摇废弃物处理………………4

附录A(资料性附录)金钱白花蛇快速PCR鉴定体系的建立…………5

前摇摇言

本标准的全部技术内容为推荐性。

本标准是对《中华人民共和国药典》标准的补充。

本标准由中华中医药学会归口。

本标准起草单位:中国中医科学院中药资源中心、广东省食品药品检验所。

本标准主要起草人:袁媛、黄璐琦、李华、蒋超、杨志业、赵玉洋、何雅莉。

请注意本标准的某些内容有可能涉及专利,本标准的发布机构不应承担识别这些专利的责任。

玉

T/CACM012—2016

金钱白花蛇快速PCR鉴定

1摇范围

本标准规定了使用快速PCR鉴定金钱白花蛇药材和饮片的通用方法和要求。

本标准适用于金钱白花蛇药材和饮片鉴定。

2摇规范性引用文件

下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有

的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准。凡是不注日期的引用文件,其最新版

本适用于本标准。

《中华人民共和国药典》(2015年版)

GB/T6682《分析实验室用水规格和试验方法》

GB/T23632《进境植物检疫截获有害生物鉴定复核规程》

GB/T27403《实验室质量控制规范食品分子生物学检测》

3摇术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3郾1

送检样品testsample

按一定规则取自某一整体的一个或多个部分,并能反映该整体的相关信息,可以作为判断该整体

的基础。

3郾2

DNA提取DNAextraction

从样品提取出DNA的方法。

3郾3

DNA扩增DNAamplification

通过一定技术使一段特定的DNA片段拷贝数增加的过程,可通过聚合酶链式反应技术实现。

3郾4

聚合酶链式反应polymerasechainreaction(PCR)

模板DNA先经高温变性为单链,两条引物分别与模板DNA两条链上相应的一段互补序列发生退

火,在DNA聚合酶的作用下,以四种脱氧核糖核酸(dNTP)为底物,使退火引物得以延伸,然后不

断重复变性、退火和延伸这一循环,使位于两段已知序列之间的DNA片段拷贝数呈几何倍数扩增。

其扩增产物可通过多种特异性和敏感性好的方法进行分析。

3郾5

阳性对照positivecontrol

一般使用对照药材代替送检样品同法DNA提取、靶核酸扩增和产物检测过程,用于证明鉴定过

程可获得目标核酸片段的操作。

3郾6