粮食、油料主要化学指标检验 酶活力的测定.pptx

酶活力的测定

;一、实验原理

淀粉酶包括几种催化特点不同的成员，其中α--淀粉酶随机地作用于淀粉的非还原端，生成麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖，同时使淀粉浆的粘度下降，因此又称为液化酶；β－淀粉酶每次从淀粉的非还端切下一分子麦芽糖，又被称为糖化酶；葡萄糖淀粉酶则从淀粉的非还原端每次切下一个葡萄糖。;几乎所有植物中都存在有淀粉酶，特别是萌发后的禾谷类种子淀粉酶活性最强，主要是α－和β－淀粉酶。Α－淀粉酶不耐酸，在pH3.6以下迅速钝化；而β－淀粉酶不耐热，在70℃15min则被钝化。根据它们的这种特性，在测定时钝化其中之一，就可测出另一个的活力。;二、材料、仪器设备及试剂

（一）材料：

萌发的小麦种子（芽长约1cm）。

（二）仪器设备：

1.分光光度计2.离心机3.恒温水浴（37℃，70℃，100℃）4.具塞刻度试管

5.刻度吸管6.容量瓶。

;（三）试剂（均为分析纯）：

1.标准麦芽糖溶液（1mg/ml）

2.3，5－二硝基水杨酸试剂

3.01mol/LpH5.6的柠檬酸缓冲液

4.1％淀粉溶液;三、实验步骤

（一）麦芽糖标准曲线的制作

（二）酶液制备

（三）酶活力的测定

（四）结果计算

淀粉酶活力=C×VT/(W×Vs×T)(