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基因工程的基本工具和基本操作程序练习
一、选择题
1.如图表示由不同的限制酶切割而成的DNA末端及相关的酶作用位点。下列叙述错误的是 ()
A.甲、乙、丙都属于黏性末端
B.甲、乙片段可形成重组DNA分子,但甲、丙不能
C.DNA连接酶的作用位点在图乙中b处
D.切割甲的限制酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子
2.科研人员利用农杆菌转化法将抗病毒蛋白基因C导入番木瓜,培育出转基因抗病毒番木瓜,Ti质粒结构模式图如图所示。下列叙述正确的是 ()
A.农杆菌的T-DNA与番木瓜基因发生重组
B.构建重组质粒需要限制酶和DNA聚合酶
C.含重组Ti质粒的农杆菌具有四环素抗性
D.转基因抗病毒番木瓜具有卡那霉素抗性
3.自然界中很少出现蓝色的花,天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞的液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因(idgS)及其激活基因(sfp)构建基因表达载体(如下图),通过农杆菌转化法导入白玫瑰中,在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。下列相关叙述错误的是 ()
A.上述获得蓝色玫瑰的方案中无须转入能调控液泡pH的基因
B.将sfp基因插入Ti质粒时,使用的限制酶是PmeⅠ和BamHⅠ
C.sfp和idgS基因具有各自的启动子,表达是相互独立进行的
D.农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上
4.科学家将马铃薯胰蛋白酶抑制剂基因Pin-Ⅱ导入杨树细胞,培育成了抗虫杨树。如图表示含目的基因的DNA分子和农杆菌质粒,图中AmpR表示氨苄青霉素抗性基因,NeoR表示新霉素抗性基因,箭头表示识别序列完全不同的4种限制酶的酶切位点。下列叙述不正确的是 ()
A.目的基因插入质粒的T-DNA上,才能整合到受体细胞染色体中
B.为使目的基因与质粒高效重组,最好选用EcoRⅠ和PstⅠ
C.成功导入重组质粒的细胞会表现为不抗氨苄青霉素、抗新霉素
D.可用PCR等技术或抗原—抗体杂交技术检测目的基因是否表达
5.某实验小组进行“DNA的粗提取与鉴定”实验,如下为实验流程:取材→破碎细胞→获得滤液→去除杂质→进一步提纯→DNA鉴定。相关叙述正确的是()
A.取材时可选用猪血、洋葱、香蕉、菜花等富含DNA的材料进行实验
B.在液体培养基中培养的大肠杆菌也可作为实验材料
C.提纯时在滤液中加入2mol/L的NaCl溶液后会出现白色丝状物DNA
D.DNA鉴定时可通过是否加入二苯胺试剂设置对照实验来观察实验现象
6.基因工程中需使用特定的限制酶切割基因载体,以便其与目的基因连接形成基因表达载体。研究人员将相同的基因载体分组并进行相应酶切处理(如表所示),其中限制酶H1和H2识别序列不同。各组基因载体经酶切处理后,进行琼脂糖凝胶电泳检测,实验结果如图所示。下列说法错误的是 ()
分组
相应酶切处理
甲
限制酶H1
乙
限制酶H2
丙
限制酶H1+H2
A.该基因载体最有可能为环状DNA分子
B.限制酶H1与H2在该载体上都有识别和切割位点
C.限制酶H1与H2在该载体上的酶切位点最短相距0.2kb
D.限制酶作用于该载体时会直接导致氢键和磷酸二酯键的断裂
7.图甲、乙中标注了相关限制酶的酶切位点。下列关于培育转基因大肠杆菌的叙述错误的是 ()
A.若想要通过PCR技术获取该目的基因,应该选用引物甲和引物丙
B.图中质粒和目的基因构建表达载体,应选用BclⅠ和HindⅢ切割
C.若将基因表达载体导入受体细胞中,需选用Ca2+转化法
D.在受体细胞中,氨苄青霉素抗性基因和目的基因可同时表达
8.A基因中含有两种限制酶BamHⅠ和MspⅠ()的酶切位点,HpaⅡ和MspⅠ酶切位点相同,酶切位点处的胞嘧啶可能被甲基化,HpaⅡ对胞嘧啶甲基化敏感(即不能切割甲基化的酶切位点),而MspⅠ则对胞嘧啶甲基化不敏感。某种小鼠(Aa)有两种表型,用每种表型的A基因分别作了3组的酶切实验:第一组单独使用BamHⅠ,第二组使用BamHⅠ+MspⅠ,第三组使用BamHⅠ+HpaⅡ,每组完全酶切产物(每一个酶切位点均被切割)通过电泳分离并使用探针得到杂交带,如图所示。下列叙述错误的是 ()
A.第一组处理后均得到包含探针的8.9kb基因片段
B.若表型1中的A基因经过第二组和第三组处理后的酶切结果分别是3.5kb和8.9kb,说明表型1中A基因中的四个MspⅠ酶切位点均被甲基化
C.若表型2中A基因的第三组酶切结果介于3.5kb和8.9kb之间,说明A基因中至少有2个HpaⅡ酶切位点被甲基化
D.该种小鼠(Aa)有两种表型可能是因为A基因甲基化程度不同影响了基因的表达
二、非选择题
9.如图A所示,质粒上含有X抗生素抗性基因(XR)和Y
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