生化分析仪的原理及常用检测方法.pptxVIP

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生化分析仪的原理及常用检测措施韦志鹃-1-11

分类持续流动式按构造原理分分立式——常用离心式干片式——急诊常用小型按测定速度分中型大型超大型(模块式)按自动化程度分半自动全自动

基本原理临床生化分析仪最常使用的是——分光光度法分光光度法——是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸取度,对该物质进行定性和定量分析的措施。

光吸取曲线

Lamber-Beer定律:分光光度法基本定律描述物质对某一波长光吸取的强弱与吸光物质的浓度及其液层厚度的关系Lamber定律:A∝lBeer定律:A∝C入射光强度I0透射光强度I物体截面为S厚度为l

Lambert-Beer(朗伯-比尔)定律

当一束平行单色光通过均匀的非散射样品时,样品对光的吸光度与样品的浓度及厚度成正比A=kcb

A---吸光度k---吸光系数c---溶液浓度b---液层厚度

吸光系数定义:吸光物质在单位浓度及单位厚度时测得的吸光度。K值的大小取决于吸光物质的性质、入射光波长、溶液温度和溶剂性质等,与溶液浓度大小和液层厚度无关。但K值大小因溶液浓度所采用的单位的不一样而异。

Lambert-Beer(朗伯-比尔)定律

郎伯-比尔定律表明:当液层厚度固定期,溶液的吸光度与溶液的浓度成正比。即:A/C=const故:只要测出某种溶液的吸光度,将它与已知浓度的原则溶液吸光度进行比较,就可以算出该溶液的浓度。

生化测定措施终点法:一点终点法二点终点法速率法:

一点终点法一点终点法——在时间-吸光度曲线上吸光度不再变化时,选择一种时间点测定吸光度值。一般在反应终点附近持续读两个吸光度,求出两点的平均值,并根据两点的差值判断反应与否到达平衡。一点终点法一般是单试剂项目采用的措施

一点终点法反应曲线

二点终点法

第二试剂加入此前,选择某一点读取吸光度Am,通过一定期间后反应达终点后测第二个吸光度值An,运用两吸光度之差计算成果。第一点吸光度值由样本自身或第一试剂与样品的非特异性反应有关,相称于样品空白,可有效的消除样品自身的吸光度,如溶血,黄疸,脂血等的干扰。两点终点法,它是双试剂项目常选用措施

两点终点

两点终点法

计算公式:C=(An-K0*Am)*KK0---体积校正因子K0=(Sv+R1)/(Sv+R1+R2)

免疫比浊法通过物质对光的散射或透射来测定物质含量的措施:散射比浊:特定蛋白分

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