临床免疫学与检验-第二章 抗原抗体反应.ppt

第二章抗原抗体反应第一节抗原抗体反应的原理

一、抗原抗体结合力

二、抗原抗体的亲和性和亲和力

三、亲水胶体转化为疏水胶体第二节抗原抗体反应的特点一、特异性二、可逆性三、比例性四、阶段性*第三节影响抗原抗体反应的因素

一、反应物自身因素

二、环境因素第四节免疫学检测技术的类型思考题小结*第一节抗原抗体反应的原理抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。物质基础:抗原表位与抗体高变区间的互补结合抗原表位与抗体高变区的沟槽分子表面的结合抗原抗体之间的结合力亲水胶体转化为疏水胶体*静电引力（electrostaticforces）范德华引力:作用最小（vanderWaalsinteractions）氢键:最具特异性（hydrogenbond）疏水作用力:作用最大（hydrophobicinteractions）抗原抗体结合力示意图一、抗原抗体结合力*抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间相适应而存在着的引力，是抗原抗体间固有的结合力亲和力(affinity)抗原抗体亲和力示意图二、抗原抗体的亲和力和亲合力*抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度亲合力(avidity)抗原抗体亲合力示意图*可见反应抗原抗体复合物(疏水胶体)电解质抗原(亲水胶体)抗体(亲水胶体)+三、亲水胶体转化为疏水胶体*第二节抗原抗体反应的特点特异性可逆性比例性阶段性*特异性：抗原与抗体结合反应的专一性抗原抗体反应特异性示意图分子基础:抗原表位与抗体分子高变区之间空间构型的互补性一、特异性*两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应交叉反应（crossreactions）抗原抗体交叉反应示意图*二、可逆性可逆性：抗原与相应抗体结合成复合物后，在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性影响因素：抗体对相应抗原的亲合力－亲合力越高，结合越牢固，越不易解离环境因素对复合物的影响－pH、离子强度*前带(prezone)：抗体过量后带(postzone)：抗原过量等价带(equivalencezone)：抗原抗体比例合适抗原抗体反应比例性示意图比例性：抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系三、比例性*第一阶段：特异性结合阶段，反应快，不可见第二阶段：反应可见阶段，反应慢，出现凝集、沉淀和细胞溶解等现象四、阶段性*第三节影响抗原抗体反应的因素抗原、抗体反应物的自身因素环境因素*一、反应物自身因素抗原:理化性状、表位种类和数目抗体:来源、特异性、亲和性、效价*电解质:生理盐水或缓冲液酸碱度:pH6～pH9温度:15℃～40℃，37℃最适二、环境因素*反应类型实验技术结果判断凝集反应直接凝集试验观察凝集现象间接凝集试验同上抗球蛋白试验同上沉淀反应液相沉淀试验观察沉淀，检测浊度免疫电泳技术观察扫描沉淀峰、沉淀弧补体参与的反应补体溶血试验观察测定溶血现象补体结合试验同上第四节免疫学检测技术的类型*反应类型实验技术结果判断中和反应病毒中和试验检测病毒感染性毒素中和试验检测外毒素毒性标记免疫反应荧光免疫技术检测荧光现象放射免疫技术检测放射性强度酶免疫技术检测酶底物显色发光免疫技术检测发光强度金免疫技术检测金颗粒沉淀*按实际用途分为:①免疫组织化学技术(immunohistochemistrytechnique,IHCT)②免疫测定(immunoassay)按检测现象分为:①放射免疫技术②荧光免疫技术③酶免疫技术④化学发光免疫技术⑤金免疫技术按测定反应体系的物理状态分为:①均相免疫测定(homogenousimmunoassay）②非均相免疫测定(heterogenousimmunoassay)标记免疫技术：用荧光物质、放射性核素、酶或化学发光物质等标记抗原或抗体，进行抗原抗体反应后，通过检测标记物对抗原或抗体进行定性、定位或定量分析*