水产品添加剂的检测—防腐剂的测定.pptx

苯甲酸和山梨酸的测定

——气相色谱法;原理;我国现阶段可以批准使用的有30多种，而苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐是最常见的食物防腐剂，其使用的主要目的就是防止食品变质。

但是，如果食品中加入过量的苯甲酸和山梨酸，就会破坏食物中的维生素，从而加重人体的负担，所以我们必须意识到苯甲酸和山梨酸的危害性。

;一、原理;二、试剂;（4）标准溶液

①苯甲酸、山梨酸标准储备溶液(1000mg/L):分别准确称取苯甲酸、山梨酸各0.1g(精确到0.0001g),用甲醇溶解并分别定容至100mL。转移至密闭容器中。

②苯甲酸、山梨酸混合标准中间溶液(200mg/L):分别准确吸取苯甲酸、山梨酸标准储备溶液各10.0mL于50mL容量瓶中,用乙酸乙酯定容。转移至密闭容器中。

③苯甲酸、山梨酸混合标准系列工作溶液:分别准确吸取苯甲酸、山梨酸混合标准中间溶液0mL、0.05mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL和10.0mL,用正己烷-乙酸乙酯混合溶剂(1+1)定容至10mL,配制成质量浓度分别为0mg/L、1.00mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、50.0mg/L、100mg/L和200mg/L的混合标准系列工作溶液。临用现配。;三、仪器;四、分析步骤;2.提取

准确称取约2.5g(精确至0.001g)试样于50mL离心管中,加0.5g氯化钠、0.5mL盐酸溶液(1+1)和0.5mL乙醇,用15mL和10mL乙醚提取两次,每次振摇1min,于8000r/min离心3min。每次均将上层乙醚提取液通过无水硫酸钠滤入25mL容量瓶中。加乙醚清洗无水硫酸钠层并收集至约25mL刻度,最后用乙醚定容,混匀。准确吸取5mL乙醚提取液于5mL具塞刻度试管中,于35℃氮吹至干,加入2mL正己烷-乙酸乙酯(1+1)混合溶液溶解残渣,待气相色谱测定。;3.仪器参考条件

（1）色谱柱:聚乙二醇毛细管气相色谱柱,内径320μm,长30m,膜厚度0.25μm,或等效色谱柱。

（2）载气:氮气,流速3mL/min。

（3）空气:400mL/min。

（4）氢气:40mL/min。

（5）进样口温度:250℃。

（6）检测器温度:250℃。

（7）柱温程序:初始温度80℃,保持2min,以15℃/min的速率升温至250℃,保持5min。

（8）进样量:2μL。

（9）分流比:10∶1。

;4.标准曲线的制作

将混合标准系列工作溶液

分别注入气相色谱仪中,以

质量浓度为横坐标,以峰面

积为纵坐标,绘制标准曲线。

5.试样溶液的测定

将试??溶液注入气相色谱

仪中,得到峰面积,根据标准

曲线得到待测液中苯甲酸、山梨酸的质量浓度。

;五、结果表述;苯甲酸和山梨酸的测定

——液相色谱法;原理;一、原理;二、试剂;（5）标准溶液配制

①苯甲酸、山梨酸和糖精钠(以糖精计)标准储备溶液(1000mg/L):分别准确称取苯甲酸钠、山梨酸钾和糖精钠0.118g、0.134g和0.117g(精确到0.0001g),用水溶解并分别定容至100mL。

②苯甲酸、山梨酸和糖精钠(以糖精计)混合标准中间溶液(200mg/L):分别准确吸取苯甲酸、山梨酸和糖精钠标准储备溶液各10.0mL于50mL容量瓶中,用水定容。

③苯甲酸、山梨酸和糖精钠(以糖精计)混合标准系列工作溶液:分别准确吸取苯甲酸、山梨酸和糖精钠混合标准中间溶液0mL、0.05mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL和10.0mL,用水定容至10mL,配制成质量浓度分别为0mg/L、1.00mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、50.0mg/L、100mg/L和200mg/L的混合标准系列工作溶液。临用现配。

;三、仪器;四、分析步骤;2.提取

准确称取约2g(精确到0.001g)试样于50mL具塞离心管中,加水约25mL,涡旋混匀,于50℃水浴超声20min,冷却至室温后加亚铁氰化钾溶液2mL和乙酸锌溶液2mL,混匀,于8000r/min离心5min,将水相转移至50mL容量瓶中,于残渣中加水20mL,涡旋混匀后超声5min,于8000r/min离心5min,将水相转移到同一50mL容量瓶中,并用水定容至刻度,混匀。取适量上清液过0.22μm滤膜,待液相色谱测定。

;3.仪器参考条件

（1）色谱柱:C18柱,柱长250mm,内径4.6mm,粒径5μm,或等效色谱柱。

（2）流动相:甲醇+乙酸铵溶液=5+95。

（3）流速:1mL/min。

（4）检测波长:230nm。

（5）进样量:10μL。

;4.标准曲线的制作

将混合标准系列工作溶液分别注入液相色谱仪中,测定相应的峰面积,以混合