无菌检验技术—无菌检查用培养基制备（药品生物检定课件）.pptx

无菌检验技术;无菌检查原理;1.2无菌检查的一般方法

无菌检查需用最严格的无菌操作法将被检查的药品或材料的样本分别接种于适合各种微生物生长的不同培养基中，于不同的适宜温度下培养一定的时间，逐日观察微生物的生长情况，并结合阳性和阴性对照试验的结果，判断供试品是否被微生物污染，从而判断供试品是否合格。

无菌检査法一般包括薄膜过滤法和直接接种法。前者适用于有抗菌作用或大容量的供试品如抗生素青霉素钠注射液和5%葡萄糖注射液(500ml)，后者适用于小容量非抗菌作用的供试品如维生素B12注射液(1ml)。;1.3无菌检查的范围

凡进入人体无菌部位(人体的血液循环系统、肌肉、皮下组织)或接触创伤、溃疡面等部位而发生作用的制品或要求无菌的材料、无菌器具均应进行无菌检查。对于规定灭菌的药物，包括注射剂及用于体腔、严重烧伤、溃疡及眼科用药等，必须严格无菌，即在规定检验量的供检品中不得检出活微生物。

需要进行无菌检查的品种包括药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器具、原料、辅料及其他要求无菌的品种。主要包括以下几类。;(1)注射剂(包括注射液、注射用无菌粉末和注射用浓溶液)，包括：用于肌内皮下和静脉的各种针剂。

(2)植入剂，指将药物与辅料制成供植入体内的无菌固体制剂，即用于包埋于人体内的药物制剂，如不溶于水的激素、避孕药物、免疫药物及抗肿瘤药物等要求无菌的制剂。心脏瓣膜以及固定金属板和有机器材等。

(3)冲洗剂，即用于冲洗开放性伤口或腔体的冲洗剂。

(4)眼用制剂。

(5)用于烧伤、创伤或溃疡的制剂。包括：用于烧伤或严重创伤的局部用散剂、凝胶剂、软膏剂、乳膏剂；用于烧伤、创伤或溃疡的气雾剂和喷雾剂等。

;(6)用于手术、耳部伤口或耳膜穿孔的滴耳剂或洗耳剂。

(7)用于手术或创伤的鼻用制剂。

(8)用于止血并可被组织吸收的制剂。如明胶发泡剂、凝血酶等，用于止血并可被组织吸收的各种药物制剂。

(9)要求无菌的医疗器械，包括外科用敷料、器材。如外科手术刀片、输血(输液)袋、博士伦等。

(10)其他要求无菌的产品。

;1.4无菌检查的环境要求

无菌检査的所有操作均需在严格控制???生物污染的环境下进行，操作环境的无菌保证程度将直接影响无菌检查用洁净室(区)环境的稳定性，为确保检査结果的可靠性，对洁净室(区)的环境质量采取合理的控制措施和评价是必要的。

无菌检查应在环境洁净度B级和局部洁净度A级的单向流空气区域內或隔离系统中进行，其全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染。单向流空气区、工作台面及环境应定期按现行国家标准进行洁净度验证。

;1.5无菌检查一般步骤

(1)玻璃仪器的洗涤、干燥、包扎、灭菌。

(2)培养基的制备及适应性检查

(3)无菌检查环境的测定。

(4)菌悬液的制备。

(5)检查方法验证。

(6)样品的无菌检查。

(7)报告检查结果。

;无菌检验技术;无菌检查用培养基种类及要求;无菌检查用培养基种类及要求;无菌检查用培养基种类及要求;无菌检查用培养基种类及要求;无菌检验技术;1.硫乙醇酸盐培养基制备操作规程

1.1目的：建立液体硫乙醇酸盐培养基配制使用操作规程。

1.2范围：本操作规程适用于液体硫乙醇酸盐培养基的配制使用。

1.3职责：质检室质检员负责本操作规程的执行，质保室质监员负责本操作规程的监督检查。

1.4仪器与试剂：

1.4.1仪器JY2002电子天平、85-数显恒温磁力搅拌器、LDZX-50FA立式压力蒸汽灭菌器、电冰箱、250ml三角瓶、500ml量筒、线绳、试管、棉塞。

1.4.2试剂纯化水、液体硫乙醇酸盐培养基、75%酒精。

;1.5操作步骤

1.5.1使用JY2002电子天平称取液体硫乙醇酸盐培养基7.25克，于250ml三角瓶内，加入250ml新沸的冷却水，溶解后，将培养基分装入试管中，塞好棉塞，包好牛皮纸扎紧试管口。

1.5.2置LDZX-50FA立式压力蒸汽灭菌器内，于115℃高压灭菌30分钟，灭菌后，可直接加样或取出放置至室温后，放入冰箱，备用（冰箱温度控制在1～4℃）。

1.5.3使用前培养基氧化层（粉红色层）的高度不得超过培养基深度的1/5，否则需经100℃水浴加热到粉红色消失（不超过20分钟）迅速冷却，只限加热一次，再使用。

;1.5操作步骤

1.5.4使用时，用75%乙醇擦瓶子外围，打开包扎的牛皮纸和棉塞，加入样品，完毕后，立即包好试管口，用线绳扎好，放入三菱瓦斯厌氧培养盒，再放入培养箱中培养。

;1.6注意事项

1.6.1要用新沸放冷的水配，记得沸的时间长一点。

1.6.2分装的时候要边搅拌边分装。

1.6.3灭菌好后使用前发现红色层过多（超过整个层高的1/5)，可在沸水浴中加热一次（仅一次，时间不得过20分钟）。

;1.7参考文献

1.7.185-2数显恒温磁力搅拌器操作规