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LSM510andLSM510META
激光扫描共聚焦显微镜
简明操作手册
Release3.5
January2005
启动系统
共聚焦系统的开关
?将REMOTECONTROL上的System/PC开关和Components开关置于ON的位置(图1)。
翻开汞灯电源开关
图1 REMOTECONTROL开关
启动共聚焦软件
LSM510
?双击计算机桌面上的LSM510图标启动共聚焦软件。
出现以下窗口(图3)。
图3 LSM510启动菜单
?点击ScanNewImages按钮。
?点击StartExpertMode按钮。
出现以下窗口(图4)。
主菜单
主菜单工具栏
二级工具栏
图4 主菜单
为采集的图像建立数据库
?点击主菜单工具栏上的File按钮。
在下一行出现File的二级工具栏(图5)。
图5 File的二级工具栏
?点击New按钮。
出现CreateNewDatabase窗口。
?选择驱动器D:。?选择文件夹,输入数据库名,并点击Creat按钮。如果需要,建立新文件夹。
图6 CreateNewDatabase窗口图7 CreateNewDatabase窗口
启动激光
?点击主菜单工具栏上的Acquire按钮翻开Acquire下的二级工具栏(图8)。
图8 Acquire二级工具栏
?点击Laser按钮翻开LaserControl窗口(图9)。
?通过点击激光单元的名字选择需要的激光。
?点击Standby按钮。
?当状态显示为Ready,点击On按钮。
?如果没有Standby按钮,那么直接点击On按钮。
图9 LaserControl窗口
设置显微镜
在直接观察和激光扫描之间切换
通过VIS,TV和LSM按钮在直接观察和激光扫描之间切换光路设置:
?点击VIS按钮将光路设置为通过目镜直接观察,此时激光切断。
?点击LSM按钮将光路设置为激光扫描,在显示器屏幕显示图像。
设置显微镜
?点击VIS按钮切换到直接观察。
?点击Micro按钮翻开MicroscopeControl窗口(图10).
选择物镜
?点击Objective按钮(图10)。
?点击需要使用的物镜,所选择的物镜会自动转入光路。
以荧光观察方式聚焦样品
?把样品放置在载物台上,盖波片要朝向物镜。
?点击ReflectedLight按钮,翻开汞灯光闸。
?点击Reflector按钮,根据样品所标记的荧光染料选择滤光片。
?对样品聚焦。
?选择需要观察的视野。
图10 MicroscopeControl窗口,如:Axiovert200M
图11 MicroscopeControl窗口
配置光路和激光
?点击LSM按钮切换到激光扫描。
图12 ConfigurationControl窗口
?点击Config按钮翻开ConfigurationControl窗口(图12)。
在通道模式下配置singletrack光路
?点击ChannelMode按钮(图12)。
?点击SingleTrack按钮(图12)。
?点击Config按钮,翻开TrackConfigurations窗口(图14)。
?在下拉列表中选择与样品所标记的荧光染料相匹配的光路配置,并点击Apply按钮。
图14 TrackConfigurations窗口
扫描图像
?点击Scan按钮,翻开ScanControl窗口(图16)。
设置初始扫描参数并扫描
?点击Mode按钮
?点击Frame按钮设置图像类型
?点击512按钮设置扫描分辨率
?点击Reset按钮重置变倍和视野中心
?点击Max按钮设置扫描速度
?点击12Bit按钮及?按钮
?选择Number为1
?点击Channels按钮
?点击1按钮 图16 ScanControl窗口
?点击Find按钮
优化扫描
?点击图像右侧的Palette按钮,选择RangeIndicator。
?点击Cont按钮进行连续扫描。
?调节DetectorGain,使图像中仅留少量红色像素。
?调节AmplifierOffset,使图像背景为蓝色。
?点击Stop按钮停止扫描。
?点击图像右侧的Palette按钮,选择NoPalette。
?点击Mode按钮
?点击1024或2048按钮设置较高的扫描分辨率
?选择Number为2或4
?点击Single按钮,完成较高质量的图像扫描
保存图像
?点击图像窗口右侧的Save或SaveAs按钮,翻开SaveImageandParameterAs窗口
?输入文件名
?点击OK按钮
关闭系统
?点击Laser按钮,选择所使用的激光
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