通用型甲型流感病毒(IAV)的实时荧光核酸恒温扩增检测试剂盒.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN102703603A

(43)申请公布日2012.10.03

(21)申请号CN201210140336.9

(22)申请日2012.05.07

(71)申请人上海仁度生物科技有限公司

地址201201上海市张江高科技园区东区瑞庆路590号7幢3楼

(72)发明人方亮于明辉冯金梦居金良

(74)专利代理机构

代理人

(51)Int.CI

C12Q1/70

C12Q1/68

C12N15/11

C12R1/93

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

通用型甲型流感病毒(IAV)的实时

荧光核酸恒温扩增检测试剂盒

(57)摘要

本发明公开了一种通用型甲型流感

病毒(IAV)的实时荧光核酸恒温扩增检测试

剂盒。包括：捕获探针、IAV扩增引物T7

引物和nT7引物、IAV检测探针、M-MLV

反转录酶和T7RNA聚合酶等试剂。本发

明试剂盒能够检测拭子中的IAVRNA，具

有特异性高、灵敏度高(可达100copies/反

应)、污染低(扩增产物RNA在自然环境下

易于降解)及快速检测(常规50分钟完成检

测)的特点，将在通用型甲型流感早期感染

的临床诊断中发挥重要作用，应用前景广

阔。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

权利要求说明书

1.一种通用型甲型流感病毒(IAV)的实时荧光核酸恒温扩增检测试剂盒，包含有

一条序列表中序列1所示的通用型甲型流感病毒(IAV)的靶标核酸

(IAVRNA)的捕获探针，一对用于在M-MLV反转录酶作用下产生

IAV靶标核酸(IAVRNA)的DNA拷贝的IAV扩增引物T7和nT7，

和一条用于与在T7RNA聚合酶作用下根据所述IAV靶标核酸

(IAVRNA)的DNA拷贝产生的RNA拷贝特异结合的IAV检测探针。

2.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于：所述捕获探针的核苷酸序列如序

列表中序列2所示；所述IAV扩增引物由T7引物和nT7引物组成，

T7引物序列如序列表中序列3所示，nT7引物序列如序列表中序

列4所示；所述IAV检测探针的核苷酸序列如序列表中序列5所

示，5’端标记FAM荧光基团，3’端标记DABCYL淬灭基团。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包含有M-MLV

反转录酶和T7RNA聚合酶，所述M-MLV反转录酶和T7RNA聚合

酶存在于一SAT酶液中，所述捕获探针存在于一核酸提取液中，

所述T7引物、nT7引物和IAV检测探针存在于一IAV检测液

中。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包含有IAV内标和

内标检测探针；所述IAV内标为IAV核苷酸序列(IAVRNA)的竞争

性内标，可与捕获探针特异性结合，并使用同一对引物(T7和nT7

引物)，由序列表中序列7所示的IAVICRNA；所述内标检测