抗原抗体反应.ppt

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抗原抗体反应*第一节抗原抗体反应的原理

第二节抗原抗体反应的特点

第三节影响抗原抗体反应的因素

第四节抗原抗体反应的类型

内容提要*抗原抗体反应(antigen-antibodyreaction):是指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。体内:溶菌、杀菌、中和毒素、促进吞噬等作用,有时亦可引起免疫病理损伤。体外:凝集反应、沉淀反应、溶血反应等。抗原表位与抗体超变区的结构互补性和亲和性,由抗原、抗体分子空间构型所决定的抗原表位与抗体超变区必须紧密接触第一节抗原抗体反应的原理1.静电引力:相反电荷之间(electrostaticforces)2.范德华引力:原子、分子之间发生,极化作用最小(vanderWaalsinteractions)3.氢键:H和电负性大的N、O,最具特异性(hydrogenbond)4.疏水作用力:疏水基团接触,对水分子排斥,作用最大(hydrophobicinteractions)抗原抗体结合力示意图一、抗原抗体结合力氢键离子键疏水作用力范德华引力离子键二、抗原抗体的亲和性和亲合力AbAgHighAffinityAbAgLowAffinity亲和性(affinity):抗体分子上一个抗原结合点与相应的抗原表位之间的结合强度,取决于两者空间构型互补的程度K=K1结合常数/K2解离常数亲和力与亲和性、与抗体结合价、抗原的有效抗原表位数目相关YKeq=104AffinityY106AvidityYYYYY1010Avidity亲合力(avidity):一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度*亲水胶体疏水胶体转化NaCl可见反应三、亲水胶体转化为疏水胶体抗原抗体为蛋白质,带负电荷,表面有水化层抗原抗体结合使表面电荷减少,水化层变薄,失去亲水性特异性可逆性比例性阶段性第二节抗原抗体反应的特点*特异性:抗原与抗体结合反应的专一性抗原抗体反应特异性示意图分子基础:抗原表位与抗体分子超变区之间空间构型的互补性一、特异性两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位,可与彼此相应的抗血清发生反应交叉反应(crossreactions)抗原抗体交叉反应示意图外-斐试验:斑疹伤寒的诊断(变形杆菌与立克次体有相同的抗原表位)二、可逆性可逆性:抗原与相应抗体结合成复合物后,在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性影响因素:抗体对相应抗原的亲合力-亲合力环境因素对复合物的影响-pH、离子强度动态平衡,K=K1/K2Ag+Ab?Ag-Ab临床应用:亲和层析纯化抗原或抗体比例性:抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系三、比例性AbexcessAgexcessEquivalence–Latticeformation*前带(prezone):抗体过量后带(postzone):抗原过量等价带(equivalencezone):抗原抗体比例合适沉淀量与抗原抗体的比例关系注意临床应用!!!第一阶段:特异性结合阶段,反应快,数秒至数分钟内完成,肉眼不可见第二阶段:反应可见阶段,反应慢,出现凝集、沉淀和细胞溶解等现象,数分钟、数小时到数日不等,且受电解质、温度和酸碱度等影响四、阶段性抗原、抗体反应物的自身因素反应的环境因素第三节影响抗原抗体反应的因素一、反应物自身因素抗原:理化性状(颗粒性、可溶性、单价抗原)表位种类和数目抗体:来源(R型或H型)浓度亲和性*电解质:0.85%NaCl溶液或各种缓冲液酸碱度:pH6~pH9温度:15℃~40℃,37℃最适,4℃冷凝集适当的振摇或搅拌加速反应二、环境因素凝集反应沉淀反应补体参与的反应中和反应标记免疫反应抗原和抗体性质的不同和反应条件的差异、反应现象不同第四节抗原抗体反应的类型

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