氨基酸发酵机制.pptx

氨基酸发酵机制;新型甜味剂-蛋白糖/zz3-12.htm

新型甜味剂阿斯巴甜又名蛋白糖，是天门冬氨酸和苯丙氨酸合成二肽甜味剂，是一个相当蔗糖甜度200倍低热值高甜度新型甜味剂。它含有安全、易吸收、不致龋齿等优点，可供糖尿病患者及忌糖者婴幼儿食用，是老年营养食品和保健食品优良甜味剂；能够制成新型糖替换品直接加入饮料或食品中；大量用于饮料，果酱、口香糖、乳制品、罐头、蜜饯婴幼儿食品等各种食品中，至今已经有3000各种食品使用阿斯巴甜。

该产品在法国首次同意使用，当前世界已经有80余个国家和地域同意使用，仅欧美国家年需求量约6000-7000吨，据预测近期世界市场每年将以20％速度增加。我国80年代开始了该项目研究工作，亚运会期间在我国首次将国产阿斯巴甜用于“真珠陈皮”唯一甜味剂，取得成功。;在医药工业上应用：氨基酸在医药上应用很广。比如，氨基酸混合液可供病人注射用，氨基酸混合粉剂可作宇航员、飞行员补品。

在化装品生产中应用：氨基酸及其衍生物与皮肤成份相同，含有调整皮肤pH和保护皮肤功效，现已广泛用于配制各种化装品。比如，胱氨酸用于护发素中，丝氨酸用于面霜中。

在农业上应用：赖氨酸、蛋氨酸添加在饲料中，能加速家畜、家禽生长，改进肉质量。

氨基酸也用于其它方面：比如，聚谷氨酸用于合成人造皮革和涂料。;第一节氨基酸发酵代谢调控;2、降低反馈作用物浓度：

谷氨酸

N-乙酰谷氨酸

N-乙酰-Y-谷氨酰磷酸

鸟氨酸

反馈抑制

瓜氨酸

精氨酸

谷氨酸棒杆菌缺乏将鸟氨酸转化为瓜氨酸酶，消除反馈抑制，可用于生产鸟氨酸。;3、控制细胞渗透性：

谷氨酸发酵：当细胞内生物素水平高时，谷氨酸不能透过细胞膜，需加入表面活性剂或青霉素，提升细胞膜通透性。

4、控制发酵环境：

氨基酸发酵是人为控制环境结果，

见表5-1

5、促进ATP积累以利氨基酸生物合成：

氨基酸合成需要能量，ATP积累有利于氨基酸生物合成。;

第二节谷氨酸发酵机制

谷氨酸，学名：α-氨基戊二酸；其单钠盐：谷氨??钠，商品名称味精，是主要调味品。当前我国味精年产量已达100万吨，产销量占世界第一位。

早期生产谷氨酸方法有两种，一是提取法：甜菜厂付产物糖蜜中含有焦谷氨酸，用强碱处理可得到谷氨酸；二是蛋白质水解法：将面筋加酸水解，再分离提纯。1957年发酵法生产谷氨酸在日本协和发酵企业投产。;谷氨酸生产菌能够在体外积累菌体最大生长需要量300多倍谷氨酸，研究发觉：大量积累并非是当初构想因为特异代谢路径造成，而是：

①代谢调整控制；

②细胞膜通透性特异调整；

③发酵条件适合；

综合调控结果。;一、谷氨酸生物合成路径及调整机制;氨基酸发酵机制;氨基酸发酵机制;一）EMP路径、HMP路径

谷氨酸生产菌存在着两种代谢路径：EMP、HMP；EMP/HMP=90/10，生物素量增加，HMP路径增加（26%，38%）。

二）TCA、DCA和CO2固定作用

1.TCA环（三羧酸循环）

α—KGA脱氢酶酶活性微弱或丧失

这是菌体生成并积累α—KGA关键，从上图能够看出，α—KGA是菌体进行TCA循环中间性产物，在α—KGA脱氢酶作用下氧化脱羧生成琥珀酸辅酶A，只有当体内α—KGA脱氢酶活性很低时，TCA循环才能够停顿，α—KGA才得以积累。在有NH4＋存在下，由谷氨酸脱氢酶催化还原氨基化生??谷氨酸。;

2.DCA环（乙醛酸循环）

菌体内必须有乙醛酸循环（DCA）关键酶——异柠檬酸裂解酶。该酶是一个调整酶，或称为别构酶，其活性能够经过某种方式进行调整，经过该酶酶活性调整来实现DCA循环封闭，DCA循环封闭是实现GA发酵首要条件。

3.CO2固定

体系中假如不存在CO2固定反应，则有：;则3/2C6H12O6+NH4+==C5H9O4N+4CO2

产率：147/（180*3/2）==54.4%;体系中存在CO2固定反应，则有：;则有：

C6H12O6+NH4+==C5H9O4N+CO2

产率：147/180==81.7%

可见，在GA生物合成过程中，CO2固定反应对于产率提升有着多么主要作用。

在许多微生物发酵过程中，通常需要检测反应器尾气组成，尤其是尾气中CO2含量，其主要目标就在于分析产物合成期间菌体代谢路径，有利于指导生产。;