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1.基因工程的四个步骤P76页第一段。2.目的基因的筛选和获取:PCR的条件、过程。
3.基因表达载体的构建:①基因工程的核心步骤是?该步骤的作用是?--P80②基因表达载体的组成部分?每一部分的作用?③构建基因表达载体的过程?--P80页和图
同种限制酶或是能产生相同末端的限制酶切割基因表达载体和含目的基因的DNA片段,DNA连接酶连接。
4.将目的基因导入受体细胞①导入植物细胞的方法有?P80-81花粉管通道法:P81农杆菌转化法:
导入动物细胞的方法有?P82受体细胞一般为受精卵,全能性高---显微注射法
导入微生物细胞的方法有?P82---Ca2+处理大肠杆菌细胞……②转化的定义--P81页资料卡,③农杆菌转化法:T-DNA的定义和特点?农杆菌转化法的过程5.目的基因的检测与鉴定①分子水平的检测--如何检测染色体DNA上是否插入外源基因?②如何检测是否转录出了mRNA?③如何检测是否翻译成了蛋白质?④个体水平如何检测?--P82性状测定、抗性检测
6.基因工程的应用:获得乳腺生物反应器生产药物的过程?--P90基因工程菌的定义---P91相关信息
7.蛋白质工程的定义---P93基础是?通过什么手段?目的是?
基因工程只能生产出自然界已有的蛋白质,蛋白质工程对目的基因进行实质性的改造,从而改造现有蛋白质或制造新的蛋白质
蛋白质工程的基本思路---P94第三段和图。;标记基因的作用机制?
仅仅用标记基因来鉴定受体细胞中是否含有目的基因,一定可靠吗?--P98T1;答案:;D;目的基因—载体连接物;1.基因工程的四个步骤P76页第一段。2.目的基因的筛选和获取:
3.基因表达载体的构建:①基因工程的核心步骤是?该步骤的作用是?--P80②基因表达载体的组成部分?每一部分的作用?③构建基因表达载体的过程?--P80页和图
同种限制酶或是能产生相同末端的限制酶切割基因表达载体和含目的基因的DNA片段,DNA连接酶连接。
4.将目的基因导入受体细胞①导入植物细胞的方法有?P80-81花粉管通道法:P81农杆菌转化法:
导入动物细胞的方法有?P82受体细胞一般为受精卵,全能性高---显微注射法
导入微生物细胞的方法有?P82---Ca2+处理大肠杆菌细胞……②转化的定义--P81页资料卡,③农杆菌转化法:T-DNA的定义和特点?农杆菌转化法的过程5.目的基因的检测与鉴定①分子水平的检测--如何检测染色体DNA上是否插入外源基因?②如何检测是否转录出了mRNA?
③如何检测是否翻译成了蛋白质?④个体水平如何检测?--P82性状测定、抗性检测
6.基因工程的应用:获得乳腺生物反应器生产药物的过程?--P90基因工程菌的定义---P91相关信息
7.蛋白质工程的定义---P93基础是?通过什么手段?目的是?
基因工程只能生产出自然界已有的蛋白质,蛋白质工程对目的基因进行实质性的改造,从而改造现有蛋白质或制造新的蛋白质
蛋白质工程的基本思路---P94第三段和图。;三、将目的基因导入受体细胞:
1.植物细胞
P80-81花粉管通道法:我国独创;多种操作方法(微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中;植物受粉后剪去柱头,将DNA溶液滴加到花柱切面,使目的基因借助花粉管通道进入胚囊)
P81农杆菌转化法:
转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
农杆菌特点:①土壤微生物;侵染双子叶植物和裸子植物,对大多数单子叶植物没有侵染能力。
②农杆菌侵染植物细胞后,Ti质粒的T-DNA转移到被侵染细胞,并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。
方法:将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA中,通过农杆菌的转化作用,使目的基因进入植物细胞。根据受体细胞不同,具体转化方法不同。叶片、花序等与农杆菌混合,筛选、培养
2.动物细胞P82
受体细胞一般为受精卵,全能性高---显微注射法
3.原核生物P82
大肠杆菌应用最广泛。---Ca2+处理大肠杆菌细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,然后将重组的基因表达载体导入。;农杆菌转化法:
1.侵染对象?
导入的受体细胞:体细胞、受精卵
2.原理?Ti质粒与T-DNA的特点?
3.目的基因插入的位置?
4.两次拼接(两次基因重组)、
两次转入(方法?)
5.转基因的植物细胞如何获得最终的新品种?
;小本P372
9.(2020·山东青岛模拟)下图为农杆菌Ti质粒的T-DNA区段结构示意图。农杆菌附着植物
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