流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座.pptx

河南省人民医院血研所1概论造血干细胞移植（HSCT）是治疗血液系统疾病、本身免疫性疾病、一些实体瘤和基因缺点等疾病主要伎俩之一。在造血干细胞移植过程中采集足够数量造血干细胞是造血干细胞移植成功关键。流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第1页

河南省人民医院血研所2概论但至今为止，尚无一个与体内重建造血全吻合造血干细胞体外检测法。早期经过有核细胞计数、集落形成单位来计算移植物中造血干/祖细胞数量，但前者与造血干细胞数量一致性差，后者试验变异性大、耗时长，其临床使用价值低。流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第2页

河南省人民医院血研所3概论20世纪80年代，发觉CD34分子在造血干/祖细胞上表示，为临床 HSCT提供了可评价造血干/祖细胞植入最低阈值强有力依据。流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第3页

河南省人民医院血研所4概论近年来尽管体外研究表明，人类CD34-脐血干细胞也有造血活性，但大量临床研究证实用富含CD34+细胞移植可安全、持久地重建多系造血。所以，当前临床及试验室依然是应用CD34+细胞进行造血干细胞移植、基因转染等。流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第4页

河南省人民医院血研所5概论而流式细胞仪含有CD34+细胞计数准确、方便、快捷等优势，已广泛地应用于造血干/祖细胞数量检测及采集时机确实定。流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第5页

河南省人民医院血研所6造血干细胞数量是造血干细胞移植成功关键原因造血干细胞移植造血干细胞数量恶性血液病一些实体瘤免疫性疾病免疫缺点病心肌血管胰岛细胞成功关键流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第6页

河南省人民医院血研所7怎样准确地计数造血干细胞数量，什么是有效质量控制成了各大试验室探讨焦点。惯用方法：集落培养法流式细胞术CD34+细胞计数法造血干细胞检测方法流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第7页

河南省人民医院血研所8集落培养法：优点：干细胞计数结果与移植结果相吻合缺点：极难标准化，只代表晚期干/祖细胞，培养时间长，不能当即判断采集物造血干细胞数量。流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第8页

河南省人民医院血研所9流式细胞术CD34+细胞计数法：优点：干细胞计数结果与移植结果相吻合快速，简单，方便。当前已取代了集落培养法流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第9页

河南省人民医院血研所10标本标识造血干细胞采集完成后马上抽样，抽样前要将采集袋中细胞与小辫中采集物混合5次以上，再封闭小辫，剪取小辫中采集物，在小辫上标识供者编号、姓名及标本名称，送试验室检测。流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第10页

河南省人民医院血研所11标本标识全部检测标本应及时贴上标签，注明患者姓名，标本类型，采集时间，申请单和标本粘贴在一起送检，申请单要详细填写患者信息、标本类型及检测项目，进行双平台检测时还需提供白细胞计数和分类。流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第11页

河南省人民医院血研所12抗凝剂选择不一样抗凝剂抗凝、标本稳定性不一样。EDTA抗凝标本，常温下可保留12-24h，肝素钠或枸橼酸钠抗凝标本可保留48h。假如标本需用血细胞分析仪同时进行白细胞计数和分类，则应选择EDTA抗凝。流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第12页

河南省人民医院血研所13抗凝剂选择1、外周血标本常选取EDTA盐抗凝，2、采集物惯用枸橼酸钠凝，3、骨髓和脐血标本可选取EDTA、肝素或ACD抗凝。流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第13页

河南省人民医院血研所14标本质量标本处理步骤越多，细胞丢失就越多。对于全血标本，溶血后不洗涤，能够使标本处理步骤减到最少，细胞丢失少。流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第14页

河南省人民医院血研所15标本质量（标本目测）标本常见问题有两种类型：1、变性或损坏标本，需马上弃之；2、标本在处理过程中出现错误操作，则需深入评价。错误操作问题需要统计下来，这对标本处理、分析以及结果地解释将很有帮助。流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第15页

河南省人民医院血研所16标本质量（溶血、凝血）1、严重溶血标本应该放弃检测。所有可能破坏标本完整性异常情况均应亲密观察，并统计下来。2、即使很小凝块也会引发血液中一些成份选择性丢失或改变，凝血标本应尽可能弃用。流式细胞术CD三四细胞计数专家讲座第16页

河南省人民医院血研所17标本质量（温度极限）经过长