分光光度法测定高锰酸钾含量.ppt

分光光度法测定高锰酸钾含量仪器学实验实验目的1.掌握吸收光谱分析的基本原理。2.熟悉应用工作曲线法进行定量测定的方法。3.了解比色皿（吸收池）一致性的检验与校正方法。实验原理光的选择性吸收物质的分子或离子团对可见和紫外光区的光波具有选择吸收作用，即不同物质的分子能选择性地强烈吸收某一个或数个波带的光波，而对其他光波很少吸收或不吸收。互补色：有色物质本身所呈现的颜色与其所选择吸收的光波的颜色为互补色。互补光：按适当强度比例可混合成白光的两种单色光即为互补光。实验原理实验原理吸收光谱曲线吸收光谱（absorptionspectrum）曲线：又称吸收曲线，是以波长?（nm）为横坐标，以吸光度A(或透光率T）为纵坐标所描绘的曲线。实验原理吸收光谱曲线实验原理朗伯-比尔定律分光光度法的基本定律，光谱分析技术的定量依据。当一束平行单色光垂直照射到样品溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度及光程（溶液的厚度）成正比关系。实验原理标准工作曲线法实验原理分光光度计的性能检查比色皿的选择波长精度的检查和校正线性误差的检查灵敏度试验重复性试验读数指示器阻尼时间试验稳定度试验实验原理比色皿的选择透光面玻璃应无色透明，与空气对比透射率不低于84%。在420~720nm范围内透光率的差值不大于5%。以空气透光率为100%，在各波长下测定干燥洁净的空比色皿的透光率，应符合以上规定。透光面平行度偏差，内径不大于0.1mm，外径不大于0.2mm。成套比色皿，同内径者，透光率相互差值不大于0.5%。比色皿应该经受HCl（6mol/L）、NH3·H2O（6mol/L）、98%乙醇、四氯化碳及苯五种介质各浸泡24h后，无脱胶渗漏现象。实验原理波长精度的检查和校正在波长标度盘上的波长标度值误差应符合以下规定：实验原理线性误差的检查在吸光度为0.1~0.8（即透光率为16%~80%）的范围内，用符合Beer定律的溶液进行测定，其吸光度与溶液浓度浓度的误差应符合以下规定：试剂与器材高锰酸钾（0.02mol/L）标准储备溶液蒸馏水722型分光光度计实验操作高锰酸钾标准储备溶液的配制：准确称取1.58gKMnO4，用二次去离子水溶解，加入14ml浓硫酸和1gKIO4，定容于500ml容量瓶，得到0.02mol/L的储备液，暗处保存。实验操作2.比色皿一致性的检验透光度一致性的核对与校正比色皿厚度核对实验操作透光度一致性的核对与校正将同样厚度的4个比色皿分别编号标记，都装空白溶液，在某一波长（510nm）处测定各比色皿的透光率，结果应相同。若有显著差异，应将比色皿重新洗涤后再装空白溶液测试，经洗涤可使透光率差异减小时，可通过多次洗涤使透光率一致。若经几次洗涤，各比色皿的透光率差异基本无变化，则可用下法校正，以透光率最大的比色皿为100%透光，测定其余各比色皿的透光率，分别换算成吸光度作为各比色皿的校正值。测定溶液时，以上述100%透光的比色皿作空白，用其他各比色皿装溶液，测得值以吸光度计算，减去所用比色皿的校正值。实验操作透光度一致性的核对与校正（举例）实验操作比色皿厚度核对用同一溶液（吸光度在0.5~0.7间为宜）分别盛于各比色皿中，在同一条件下测定其吸光度。测得值应相同（若有透光校正值应扣除）。若各比色皿测得值间有超出允许误差（0.5%）的差值，则说明厚度有差别，测得值大的厚度大。若不能更换选配，必要时也可用校正值，即以其中一个为标准，将其测得值与其他比色皿的测得值之比值作为换算成同一厚度时用的因数。实验操作高锰酸钾溶液标准曲线的绘制：分别准确移取0.25，0.5，1.0，2.0，4.0ml的KMnO4溶液（0.01mol/L），于50ml容量瓶中，用二次去离子水定容，得到浓度分别为：0.05，0.10，0.20，0.40，0.80mmol/L的KMnO4溶液。实验操作高锰酸钾溶液标准曲线的绘制：实验操作4.吸收波长的选择：将配置好的高锰酸钾标准溶液，用1cm比色皿，以蒸馏水为参比，在440-580nm波长范围内，每隔10nm测一次吸光度，在最大吸收波长附近，每隔5nm测一次吸光度。每调一次波长，必须重新调吸光度为零。在坐标纸上以波长?为横坐标，以吸光度A为纵坐标，绘制吸收曲线，从吸收曲线上选择最大吸收波长?max作为测定波长，并观察不同浓度高锰酸钾溶液的?max和吸收曲线的变化规律。实验操作5.工作曲线的绘制