基于AMPK调控ACC_CPT1信号通路介导脂肪酸代谢探究化瘀祛痰方含药血清对HepG2细胞脂质沉积的影响.pdfVIP

第４２卷第３期中华中医药学刊Ｖｏｌ．４２Ｎｏ．３

２０２４年３月ＣＨＩＮＥＳＥＡＲＣＨＩＶＥＳＯＦＴＲＡＤＩＴＩＯＮＡＬＣＨＩＮＥＳＥＭＥＤＩＣＩＮＥＭａｒ．２０２４

ＤＯＩ：１０．１３１９３／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３７７１７．２０２４．０３．０３６

基于ＡＭＰＫ调控ＡＣＣ／ＣＰＴ１信号通路介导脂肪酸代谢探究

化瘀祛痰方含药血清对ＨｅｐＧ２细胞脂质沉积的影响

１，２２１１

吕丹，金迪，隋国媛，贾连群

（１．辽宁中医药大学，辽宁沈阳１１０８４７；２．辽宁中医药大学附属医院，辽宁沈阳１１００３２）

摘要：目的观察化瘀祛痰方含药血清对ＨｅｐＧ２细胞脂质沉积的影响，并探究其作用机制。方法采用１ｍｍｏｌ／Ｌ油

酸棕榈酸混合液诱导ＨｅｐＧ２细胞２４ｈ构建脂质沉积模型，分别给予化瘀祛痰方含药血清、ＡＭＰ依赖的蛋白激酶［Ａｄｅｎ

ｏｓｉｎｅ５’－ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ（ＡＭＰ）－ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ，ＡＭＰＫ］抑制剂及抑制剂＋中药联合干预，油红Ｏ染色观察脂质

沉积情况，试剂盒检测细胞中甘油三酯（ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ，ＴＧ）含量，蛋白印迹法检测ＡＭＰＫ、ｐ－ＡＭＰＫ、乙酰辅酶Ａ羧化酶（Ａ

ｃｅｔｙｌＣｏＡＣａｒｂｏｘｙｌａｓｅ，ＡＣＣ）、ｐ－ＡＣＣ、肉碱棕榈酰基转移酶－１（ＣａｒｎｉｔｉｎｅＰａｌｍｉｔｏｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ－１，ＣＰＴ１）蛋白相对表达量，

以及实时荧光定量法检测细胞中ＡＭＰＫ、ＡＣＣ、ＣＰＴ１ｍＲＮＡ相对表达水平。结果与模型组相比，化瘀祛痰方含药血清组

细胞中脂滴数目减少、ＴＧ水平降低，细胞中ｐ－ＡＭＰＫ、ＣＰＴ１蛋白及ＣＰＴ１ｍＲＮＡ相对表达量升高，ＡＣＣ、ｐ－ＡＣＣ蛋白及

ＡＣＣｍＲＮＡ相对表达量显著降低（Ｐ＜００１），ＡＭＰＫ蛋白及基因相对表达水平无明显差别（Ｐ＞００５）；ＡＭＰＫ抑制剂组

细胞中脂滴及ＴＧ含量升高，ＡＭＰＫ、ＣＰＴ１蛋白及ｍＲＮＡ相对表达量降低，ＡＣＣ、ｐ－ＡＣＣ蛋白及ＡＣＣｍＲＮＡ相对表达量

升高（Ｐ＜００５或Ｐ＜００１）；与ＡＭＰＫ抑制剂相比，抑制剂＋中药含药血清组细胞中脂滴数目减少、ＴＧ水平降低，

ＡＭＰＫ、ｐ－ＡＭＰＫ蛋白及ＡＭＰＫｍＲＮＡ相对表达水平无显著差异（Ｐ＞００５），ＡＣＣ、ｐ－ＡＣＣ蛋白及ＡＣＣｍＲＮＡ相对表达

量降低、ＣＰＴ１则相对表达升高（Ｐ＜００５或Ｐ＜００１）。结论化瘀祛痰方含药血清可能通过激活ＡＭＰＫ使其磷酸化，并

调控ＡＣＣ／ＣＰＴ１信号通路，抑制脂肪酸合成，促进脂肪酸氧化，从而降低ＨｅｐＧ２细胞内的甘油三酯水平及脂质沉积。

关键词：化瘀祛痰方含药血清；ＡＭＰＫ；磷酸化；脂肪酸代谢；脂质沉积

中图分类号：Ｒ２８９．５文献标志码：Ａ文章编号：１６７３７７１７（２０２４）０３０１９４０５

ＥｆｆｅｃｔｏｆＳｅｒｕｍＣｏｎｔａｉｎｉｎｇＨｕａｙｕＱｕｔａｎＰｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ（化瘀祛痰方）ｏｎＬｉｐｉｄＤｅｐｏｓｉｔｉｏｎｉｎ

ＨｅｐＧ２ＣｅｌｌｓＢａｓｅｄｏｎＡＭＰＫＲｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＦａｔｔｙＡｃｉｄＭｅｔａｂｏｌｉｓｍ

ＭｅｄｉａｔｅｄｂｙＡＣＣ／ＣＰＴ１ＳｉｇｎａｌｉｎｇＰａｔｈｗａｙ

１，２２２２

ＬＹＵＤａｎ，ＪＩＮＤｉ，ＳＵＩＧｕｏｙｕａｎ，ＪＩＡＬｉａｎｑｕｎ