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分子生物学检查南京中医药大学西内教研室徐庆
分子生物学定义分子生物学〔molecularbiology)是从分子水平研究生命现象的科学。它的核心内容是通过生物的物质根底—核酸、蛋白质、酶等生物大分子的结构、功能及其相互作用等运动规律的研究来说明生命分子根底,从而探索生命奥秘
分子生物学开展简史1871年Miesscher首次从莱茵河鲑鱼精子中别离到DNA1953年Watson和Crick说明DNA双螺旋结构1958年Meselson和Stahl提出DNA半保存复制模型1965年发现质粒1966年Nirenberg等破译全部遗传密码1970年Smith别离到第一种核酸内切限制酶1973年Boyer和Cohen建立DNA重组技术1977年Sanger以及Maxam和Gilbert创造快速DNA测序技术1981年Palmiter和Brinster成功获得第一只基因小鼠1985年PCR方法问世;Watson出任“人类基因组方案”首席科学家1990年美国批准第一个体细胞基因治疗方案
分子生物学开展简史1995年英国“自然”杂志发表人类基因组全物理图1997年英国爱丁堡罗斯林研究所培养出第一只克隆羊多莉1999年中国正式参加“人类基因组方案〔HGP〕”2000年全部人类基因组测序工作宣告完成,进入后基因组方案时代(基因克隆方案、基因组多样性方案、cDNA方案、蛋白质方案、细胞方案〕
分子生物学与现代医学一、分子生物学在发病机制中的应用1阿尔兹海默病〔AD〕的基因定位2生物活性多肽及蛋白质mRNA研究确证肾素血管紧张素系统在遗传性高血压发病中起重要作用3对某些病毒致病作用的研究发现肝癌细胞DNA整合有HBV-DNA,认为乙肝与肝癌发病密切相关4认识了某些遗传疾病的发病机制地中海贫血是?或?基因缺失或点突变所致
二、分子生物学在疾病诊断中的作用发病过程:基因突变---mRNA---蛋白质〔激素〕---细胞病变---组织器官病变---临床病症根据基因突变检测、基因连续性分析、mRNA检测三种途径,使用核酸分子杂交和PCR技术,进行分子生物学检查,使遗传性疾病、感染性疾病和肿瘤等的诊断提前到基因和mRNA水平
三、分子生物学在疾病治疗中的应用基因治疗:将目的基因加以修饰,转移到体细胞中,以到达治疗作用应用:单基因遗传病、肿瘤、心血管、自身免疫疾病及病毒感染等危害较大且目前无有效治疗途径的疾病四、重组DNA技术与新药研究重组微生物、基因疫苗、细胞因子合成、转基因动植物等
分子生物学的一般原理和研究方法
一、核酸的结构和功能1核酸的一级结构:磷酸二酯键连接成的核苷酸链核苷酸:戊糖、磷酸基团、碱基碱基:DNA:A、G、T、CRNA:A、G、U、C核酸是极性分子,5’端为磷酸基团,3’端为羟基,核酸序列的习惯写法是5’端3’端
核酸的结构和功能2DNA的二级结构:著名的双螺旋结构两条核苷酸链通过碱基间氢键相连〔A—T,C—G〕,走向相反。DNA的变性与复性:诱导因素:加热、酸、碱、乙醇、丙酮、高盐等应用:分子杂交的根底
核酸的结构和功能3DNA的三级结构:DNA双螺旋和核小体串珠装状的核小体压缩成螺旋形,进一步折叠成染色单体,DNA长度因此缩短10000倍4DNA功能携带和传递遗传信息,表达遗传过程的相对保守性遗传的中心法那么DNARNA蛋白质复制转录逆转录复制〔病毒〕翻译
核酸的结构和功能5DNA的半保存复制原那么
核酸的结构和功能6RNA:rRNA:组成核糖体mRNA:传递遗传信息由核内至胞浆的核糖体tRNA:转运氨基酸密码子:共64个密码子,有61个用于编码20个氨基酸,另外还有3个作为终止密码(UAA、UAG、UGA)
二、基因及其表达调控基因:合成有功能的蛋白质多肽链或RNA所必需的全部核酸序列。一个基因不仅包括编码序列,还包括所需的调控序列、5’端不翻译序列、内含子和3’非翻译序列等所有核酸序列基因组:一个生物体的所有基因。人类指23对染色体中的所有基因
基因及其表达调控基因表达调控:多层次DNA及染色体水平转录水平转录后水平翻译水平蛋白质加工水平
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