植物中绿原酸类物质的测定 高效液相色谱法.pdf

GB/T—XXXX

植物中绿原酸类物质的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了植物中绿原酸类物质，包括新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、

异绿原酸C的测定方法—高效液相色谱法。

本标准适用于植物中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C等6种绿

原酸类物质的测定。

2原理

试样中绿原酸类物质（新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C）经

50%甲醇水溶液超声提取，反相液相色谱-紫外检测器测定，以保留时间进行定性，外标法定量。

3试剂与材料

如无特别说明，所用的试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

3.1试剂

3.1.1甲醇（CHOH）色谱纯

3

3.1.2乙腈（CHCN）色谱纯

3

3.1.3甲酸（HCOOH）色谱纯

3.2试剂配制

3.2.10.1%甲酸水溶液：准确量取1mL甲酸（3.1.3）于1L容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，混匀。

3.2.250%甲醇水溶液：准确量取250mL甲醇（3.1.1）和250mL水，混匀，作为提取溶剂。

3.3标准品

绿原酸(CHO，CAS号:327-97-9)，纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质；

16189

新绿原酸(CHO，CAS号:906-33-2)，纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物

16189

质；

隐绿原酸(CHO，CAS号:905-99-7)，纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物

16189

质；

异绿原酸A(C25H24O12，CAS号:2450-53-5)，纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标准

物质；

异绿原酸B(C25H24O12，CAS号:14534-61-3)，纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标

准物质；

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GB/T—XXXX

异绿原酸C(C25H24O12，CAS号:32451-88-0)，纯度≥95%，或经国家认证并授予标准物质证书的标

准物质。

3.4标准溶液的配制

3.4.1标准储备液(2.50mg/mL)：分别准确称取绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、

异绿原酸C各0.025g（精确至0.0001g），用甲醇（3.1.1）溶解并定容至10mL。混匀后转入棕色玻璃

容器中，4℃冰箱保存，保存期三个月。

3.4.2标准中间液(100μg/mL)：分别准确量取以上标准储备液（3.4.1）各1.00mL于同一25mL容量瓶中，

用50%甲醇水溶液稀释至刻度，混匀。临用前配制。

3.4.3标准系列工作液：分别准确吸取标准中间液（3.4.2）0.500mL、2.50mL于100mL容量瓶中，用50%

甲醇水溶液（3.2.2）定容至100mL；再分别准确吸取标准中间液（3.4.2）1.00mL、2.50mL、5.00mL

于10mL容量瓶中，用50%甲醇水溶液（3.2.2）定容至10mL。得到标准系列工作的浓度分别为0.500

μg/mL、2.50μg/mL、10.0μg/mL、25.0μg/mL、50.0μg/mL。临用前配制。

4仪器与设备

4.1高效液相色谱仪：配紫外检测器

4.2电子天平（感量0.0001g）。

4.3旋涡震荡器。

4.4超声波提取仪。

4.5离心机：转速不低于4000r/min。

4.6一次性微孔滤膜：带0.45μm微孔滤膜，有机系。

5分析步骤

5.1试样的制备

称取约2g