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（一）峰形及保留时间变化
诊可能原因解决方法
状
一.1.柱温变化柱恒温
保
2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱
留
时3.缓冲液容量不够用25mmol/L的缓冲液
间
4.柱污染每天冲洗柱
变
化5.柱内条件变化稳定进样条件,调节流动相
6.柱快达到寿命采用保护柱
7.色谱柱没有平衡在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱
8.流动相组分变化防止变化（蒸发、反应等）
二.1.流速增加检查泵,重新设定流速
保
2.样品超载降低样品量
留
时3.键合相流失流动相PH值保持在3～7.5；检查柱的方向
间
4.流动相组成变化防止流动相蒸发或沉淀
缩
短5.温度增加柱恒温
三.1.流速下降管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡
保
2.硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱
留
时3.键合相流失同前(二)3
间
4.流动相组成变化同前(二)4
延
长5.温度降低同前(二)5
四.1.样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%
出
2.样品溶剂过强采用较弱的样品溶剂
现
肩3.柱塌陷或形成短路通道更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件
峰
4.柱内烧结不锈钢失效更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品
或
分5.进样器损坏更换进样器转子
叉
五.1.进样阀残余峰每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗
鬼
2.样品中未知物处理样品
峰
3.柱未平衡重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色
谱)
4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱)每天新配,用抗氧化剂
5.水污染(反相)通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC级的水
六.1.气泡(尖锐峰)流动相脱气,加柱后背压
基
2.污染(随机噪声)清洗柱,净化样品,用
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